聚乙烯亚胺修饰的纳米fepo4在dna分离纯化中的应用研究

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1、万方数据分类号UDC密级学位论文聚乙烯亚胺修饰的纳米FeP04在DNA分离纯化中的应用研究作者姓名：胡琳琳指导教师：王建华教授东北大学理学院分析科学研究中心申请学位级别：硕士学科类别：理学学科专业名称：分析化学论文提交日期：2014年6月论文答辩日期：2014年6月学位授予日期：2014年7月答辩委员会主席：徐章润教授评阅人：杨梅教授陈旭伟教授东北大学2014年6月万方数据AThesisinAnalyticalChemistryInvestigationsontheSeparationandOntheandlnVeStlgat

2、lonSPurificationofDNAwithPolyethyleneimine-·modifiedNanoFeP04ByHuLinlinSupervisor：ProfessorWangJianhuaNortheasternUniversityJune2014万方数据独创性声明本人声明，所呈交的学位论文是在导师的指导下完成的。论文中取得的研究成果除加以标注和致谢的地方外，不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含本人为获得其他学位而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示

3、谢=亡■。息．o学位论文作者签名：硐罚阶、够队日期：矿烨6．20学位论文版权使用授权书本学位论文作者和指导教师完全了解东北大学有关保留、使用学位论文的规定：即学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人同意东北大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索、交流。作者和导师同意网上交流的时间为作者获得学位后：半年口一年口一年半口学位论文作者签名：胡朴硝札签字目期：讼他1f．；D万方数据东北大学硕士学位论文摘要聚乙烯亚胺修饰纳米FeP04在DNA分离纯化中的应用研究摘要本文以聚乙

4、烯亚胺修饰的磷酸铁纳米粒子作为固相萃取分离介质，建立了一种快速、高效的DNA分离纯化方法。首先通过静电作用将阳离子型超支化聚合物．聚乙烯亚胺(PEI)修饰在纳米磷酸铁表面，制备了PEI．FeP04纳米材料。采用红外光谱(FT-IR)、扫描电镜(SEM)和Zeta电位等方法对所得的PEI．FeP04纳米材料进行了表征。对PEI．FeP04纳米材料在DNA的分离纯化中的表现性能进行了研究，在pH4．0时，2．OmgPEI．FeP04纳米材料可对1．0mL50mgL。1DNA达到完全吸附，而此时蛋白质对DNA的吸附基本不产生干扰。P

5、EI．FeP04纳米材料对DNA的吸附在30s达到吸附平衡，其吸附行为符合Langmuir模型，最大吸附容量为61．88mgg～。吸附的DNA可采用pH10．0的BR缓冲溶液进行洗脱，洗脱率能达到85％。将所建立的分离纯化过程应用于模拟LDNA样品、人体全血样品和大肠杆菌样品中DNA的分离纯化，以纯化后的DNA为模板，成功对500bpXDNA、543bp人体P53基因以及700bpGFP基因进行PCR扩增，表明所建立的分离纯化方法可从复杂基体中提取的DNA能够满足下游PCR扩增实验的需要。关键词：纳米磷酸铁；聚乙烯亚胺；DNA

6、；固相萃取；分离纯化．．III．．万方数据东北大学硕士学位论文AbstractInvestigationsontheSeparationandPurificationofDNAwithPolyethyleneimine-modifiedNanoFED04AbstractInpresentwork，arapidandefficientsolid-phaseextractionprotocolisdevelopedforthepurificationofDNAbyusingPEI-FeP04sasanextractionmediu

7、m．Firstly,acationichyperbranchedpolymerpolyethyleneimine(PEI)wasimmobilizedonthesurfaceofnano—FeP04viaelectrostaticinteraction．TheobtainedPEI—FeP04nano—materialwascharacterizedbymeansofFT-IR，SEMandsurfacechargeanalysis(Zetapotential)．TheperformancesoftheobtainedPEI-

8、-FeP04nano·-materialintheseparationandpurificationofDNAweresubsequentlyinvestigated．AtpH4．0，anadsorptionefficiencyof100％for50mgL叫DNAina1．0