湖南野生狗牙根种质资源遗传多样性研究

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1、中南林业科技大学学位论文原创性声明㈣㈣㈣㈣Y1848：：

2、i[§‘季本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品，也不包含为获得中南林业科技大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式表明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向

3、国家有关部门或机构送交论文的复印件或电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权中南林业科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于：1、保密口，在年解密后适用本授权书。／2、不保密戳(请您在以上相应方框打“√")作者签名：黝鼢乞Rl

4、黾y导师签名：主．，1易丘洲年6‘月『1日中南林业科技大学硕士学位论文湖南野生狗牙根种质资源遗传多样性研究摘要本实验以采集自湖南省内的30份野生狗牙根(c功D锄幽f咖疗)种质资源为研究材

5、料，从形态学和分子水平研究探讨其遗传多样性。研究结果表明：1、湖南野生狗牙根种质资源在13个形态特征上出现较大变异，其中叶宽、根系深、叶色、叶毛和叶面积的变异都达到了30％以上。相关分析表明：草层越高，狗牙根叶片越窄，叶面积越小，叶色也越浅，而其茎节问长度越大；叶片越长的狗牙根，其叶面积越大，叶毛也越显著；狗牙根叶片宽度越大，其叶片面积也会相应较大；茎节间长度越长，狗牙根的茎色和叶色也就越浅；茎节直径越大的狗牙根，其叶毛往往也越发不明显；狗牙根的匍匐茎越长，其叶片的颜色会相应较浅；叶毛越长，狗牙根的茎

6、色就越浅；狗牙根茎色颜色越深，其叶色也越深。2、形态性状进行聚类分析表明：在欧氏距离7．178处将30份野生狗牙根种质资源材料分为5个大类，每个大类狗牙根的外部表现型与其生长的自然环境，尤其表现在与海拔、经纬度的密切相关。3、根据供试材料在长沙地区的生长绿期，初步筛选出了适合在长沙用于草坪栽培的3份供试材料。4、本研究探索并确立了适合于狗牙根ISSR．PCR分子标记的最佳反应体系。5、本文采用ISSR分子标记技术对30份湖南野生狗牙根种质资源的遗传多样性进行研究。lO个引物共扩增出167个位点，其中1

7、65个为多态位点，占98．80％。POPGENE分析结果表明：狗牙根具有丰富的遗传变异(在单份材料水平上，H=O．1883，I=O．3137；在群体水平上，PPL=24．60％，H=0．0947，I-0．1404)。Nei’s遗传多样性分析表明，各群体间产生了一定程度的遗传分化(GstO．4963)。最低遗传多样性水平出现在长株潭狗牙根群体，而最高遗传多样性水平出现在张家界狗牙根群体。根据Nei’s遗传距离(D)，利用UPGMA法构建的12个群体的遗传关系聚类图得出：岳阳狗牙根群体和常德狗牙根群体遗传

8、距离最近，优先聚成一支；娄底狗牙根群体和邵阳狗牙根群体，与其它狗牙根群体遗传距离相距较远。这与其地理分布格局大致吻合，即群体间的地理距离较近，其遗传距离也相对较小。6、利用ISSR数据结果，使用NTSYS巾c2．10软件计算出的湖南省30份野生狗牙根材料间遗传相似系数(GS)值为O．6407～O．8862。采用UP(MA法对供试30份材料进行聚类分析表明，在GS=O．75处，可把30份狗牙根分为3个类群。根据ISSR遗传相似系数划分的类群与地理分布有一定关系。这与主成分分析结果较为一致。]中南林业科技

9、大学硕士学位论文湖南野生狗牙根种质资源遗传多样性研究7、从形态学水平和DNA水平的标记的聚类分析来看，聚类结果不完全相同。这是因为形态特征受环境影响较大且不很稳定，用于检测的形态标记有限；DNA标记是直接从核酸遗传物质的角度探讨其遗传变异，能揭示更多的遗传信息，但检测的灵敏度和效率因方法不同而有一定差异。形态和ISSR分子标记从不同层次上揭示了狗牙根的遗传多样性，不能以一种方法代替另一种方法，只有相互结合，综合分析，才能够较全面地揭示狗牙根的遗传本质综合上述研究结果可以得出，湖南省野生狗牙根在形态学和

10、DNA分子标记的遗传多样性丰富。关键词：狗牙根；种质资源；形态；ISSR；遗传多样性Ⅱ中南林业科技大学硕上学位论文湖南野生狗牙根种质资源遗传多样性研究ABSTRACTInthisexperiment'30wild劬。矗口"砌c纱，D刀germplasmresourceswerecollectedfbmHunanproVinceasresearchmateria1．ThegeneticdiVersi哆ofthesemate^alshadbeenstudie