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时间:2019-03-01
《细菌整合子与其抗生素耐药性相互关系的初探》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、分类号UDC密级编号十I初大学CENTRALSOUTHUNIVERSITY硕士学位论文论文题目:细菌整合子与其抗生素耐药性相互关系的初探Apilotstudyoninte卜relationshipbetweenintegron学科、专业:研究生:导师姓名及其专业技术职称:临床检验诊断学GovindaPaudel(高伟)伍勇教授中南大学二。一二年五月分类号硕士学位论文细菌整合子与其抗生素耐药性相互关系的初探Apilotstudyoninter—relationshipbetweenintegronandbacterialantibioticresistance作者姓名:学科专业
2、:GovindaPaudel(高伟)临床检验诊断学学院(系、所):湘雅三医院指导教师:伍勇教授论文答辩日期2塑Q量丝答辩委员会主席中南大学二零一二年五月一奄一一,年血月原创性声明本人声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了论文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名:圭五拿日期:墨!竺年三月.望日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定,即
3、:学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内容,可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名:塑』叁导师签名避日期:碹年上月坐日摘要1.产ESBL菌与非产ESBL菌中整合子的分布及其相互关系背景近年来,人们发现整合子的水平传播是导致耐药性快速转移的主要原因。整合子是通过位点特异性重组而将开放阅读框集合在一起的一种基因元件,整合子能通过确保基因的准确表达而将这些开放阅读框转变成功能性
4、的基因。EsBL基因常与其他耐药基因共同存在于同一质粒上,导致细菌较强的耐药性,对临床的抗感染治疗带来了巨大的挑战。当前,有关EsBL基因的研究已相当普遍,但是对产EsBL菌中整合子的分布情况的研究还相对较少。目的本实验以中南大学湘雅三医院临床分离的大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌为研究对象,对产EsBL菌与非产EsBL菌中的整合子进行研究。本研究的目的是研究整合子与EsBL基因的分布情况与细菌耐药的关系,以及在产EsBL菌株与非产EsBL菌株中整合子的分布的不同导致的细菌耐药性的差异,同时分析在含有整合子的细菌中EsBL基因对细菌耐药性的影响。方法收集中南大学湘雅三医院2009年6
5、月到2009年12月的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共172株,采用PcR对I类整合酶基因进行检测,对整合子的可变区进行测序并用AIuI酶进行限制性片段长度多态性分析。结果产EsBL菌株中I类整合子阳性率为69‰非产EsBL菌株中I类整合子阳性率为40.2%,差异有统计学意义,P6、合子阴性菌株中,产EsBL菌株有8种抗菌药的耐药率高于非产EsBL菌株。在整合子阳性菌株中,有84%的菌株可检测到可变区,仍有15.9%菌株则无法测得。在整合子的可变区中未发现EsBL基因,整合子与ESBL基因的共同存在情况仍有待于进一步研究探讨。我们发现在整合子存在多种耐药基因盒,而d献17和aadA7同时存在的情况较多(41.4%)。有36.2%的菌株携带多个整合子。结论EsBL基因与I类整合子在细菌中可以同时存在,并且它们的同时存在提高了细菌的多重耐药水平。2.在抗生素选择性压力下的整合酶表达.背景在选择性压力存在的情况下,细菌能够通过遗传变异诱发一系列的反应来获得选择7、优势。这些反应包括sOS反应、一般的压力反应、热休克反应和严紧反应,这些反应都能够影响易错聚合酶的调节功能。在不同的选择性压力下,细菌对抗生素的耐药基因一旦产生,就可以通过整合子的位点特异性重组机制在不同的菌株之间进行传播,从而导致新的耐药菌株的产生。亚抑菌浓度的抗生素可以诱发细菌的耐药性,另外也可以通过类似sos反应和一般压力反应的遗传保护机制来诱导。当诱导因素存在时,细菌能够通过改变自身基因的表达来适应这些压力。目的整合酶基因在细菌耐药性基因水平转移的过程中具有重要作用,本研究旨在分析在亚抑菌浓度的
6、合子阴性菌株中,产EsBL菌株有8种抗菌药的耐药率高于非产EsBL菌株。在整合子阳性菌株中,有84%的菌株可检测到可变区,仍有15.9%菌株则无法测得。在整合子的可变区中未发现EsBL基因,整合子与ESBL基因的共同存在情况仍有待于进一步研究探讨。我们发现在整合子存在多种耐药基因盒,而d献17和aadA7同时存在的情况较多(41.4%)。有36.2%的菌株携带多个整合子。结论EsBL基因与I类整合子在细菌中可以同时存在,并且它们的同时存在提高了细菌的多重耐药水平。2.在抗生素选择性压力下的整合酶表达.背景在选择性压力存在的情况下,细菌能够通过遗传变异诱发一系列的反应来获得选择
7、优势。这些反应包括sOS反应、一般的压力反应、热休克反应和严紧反应,这些反应都能够影响易错聚合酶的调节功能。在不同的选择性压力下,细菌对抗生素的耐药基因一旦产生,就可以通过整合子的位点特异性重组机制在不同的菌株之间进行传播,从而导致新的耐药菌株的产生。亚抑菌浓度的抗生素可以诱发细菌的耐药性,另外也可以通过类似sos反应和一般压力反应的遗传保护机制来诱导。当诱导因素存在时,细菌能够通过改变自身基因的表达来适应这些压力。目的整合酶基因在细菌耐药性基因水平转移的过程中具有重要作用,本研究旨在分析在亚抑菌浓度的
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