河南省小麦全蚀病菌变种类型鉴定及致病力测定

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1、河南农业大学硕士学位论文河南省小麦全蚀病菌变种类型鉴定及致病力测定姓名：许筱申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：王振跃201205硕士学位论文摘要小麦全蚀病是小麦上的毁灭性病害，近几年该病害在河南省的危害逐年加重，严重影响了河南省小麦的安全生产。为了弄清楚河南省小麦全蚀病病原菌的情况，本试验从河南省郑州、许昌、开封、漯河、商丘、周口和驻马店等7个地区10个县(市)分别采集具有典型症状的小麦全蚀病病株样本，经室内组织分离、纯化，共得Nd,麦全蚀病菌74株。通过对供试菌株进行形态学，生理生化特性的鉴定，并对其

2、rDNA—ITS区段序列和致病力进行分析和测定，旨在确定河南省小麦全蚀病菌变种类型，以及不同地区，不同菌株之问的致病力差异。形态学鉴定的结果表明：在PDA培养基上，菌落呈圆形，生长初期呈现灰白色，后期颜色加深，变成灰褐色乃至黑色，菌落的边缘向中心反卷。所有供试菌株均有褐色粗壮的匍匐菌丝，并在分枝处形成“八”的典型特征；均产生瓶梗孢子，新月形或者半月形；只产生卵圆形，长棒形或者近球形的简单附着枝，常簇生，形成微菌核团；采用PD三角瓶法人工诱导子囊壳，供试菌株均可产生子囊壳，埋生或者半埋生，也多见于瓶壁的菌丝间，单生

3、，壳体球形或卵圆形，黑色，外有茸状菌丝；子囊单壁，成熟后棍棒状，上部钝圆，下部稍窄具柄，大小为98．6～127．9pm×9～151un；子囊孢子线形，稍弯曲，成熟的子囊孢予具有清晰的隔膜，大小为98．6～127．99mx9～15pm。生理生化特性的研究分析结果显示：大多数供试菌株的最适宜生长温度为256C，最适宜PH为7．0。2．5％的新鲜燕麦}fPDA培养基对供试菌株的生长有明显的抑制作用。而1％L．半胱氨酸PDA培养基对于供试菌株产生的作用则大不相同，部分菌株生长速度减慢，部分菌株生长速度加快，少数菌株的生长

4、速度几乎没有变化，因此，L一半胱氨酸不能作为鉴定变种的依据。综上所述特征，供试74株河南省小麦全蚀病菌均属于禾顶囊壳小麦变种(Gaeumanomycesgraminisvar．tritici)。利用Rachadwong和王美南设计的针对禾顶囊壳变种的特异性引物对供试菌株进行PCR检测，通过对产生的特异性条带进行观察，结果显示，所有菌株均得到了大小为870bp的DNA片段，与禾顶囊壳小麦变种产生的条带大小一致，并无其他变种的特异性条带出现。利用真菌通用引物ITS4和ITS5针对供试菌株基因组的ITSI．5．8s．I

5、TS2进行PCR扩增，使用MEGA4．1软件对PCR产物的测序结果进行ITS聚类分析，建立系统发育树后，结果址示：本实验的74株供试菌株全部和6株GenBank登录的禾顶囊壳小麦变种代表性菌株聚在了一起，具有很高的同源性，与其他变种的遗传距离相对较远，可以明显的与其他变种区分开来。以上碡种分予技术的研究结果与形念学鉴定的结果相符。温室测定74株小麦全蚀病菌菌株对小麦的致病力，结果显示，河南省小麦全蚀病菌菌株之间致病力存在显著性差异，分为强、中、弱二种致病力类型，主要以强，中致病力类型为主，分别占63．89％和29

6、．73％。以平均病情指数为依据，河南省不同地区问的小麦全蚀病硕：￡学位论文摘要菌致病力存在一定的差异，以周口、商丘、漯河等地区菌株的致病力最强，郑州地区菌株的致病力最弱。河南省内同一地区(以开封地区为例)不同小麦全蚀病菌菌株之间的致病力存在极显著性差异。关键词：小麦全蚀病；Gaeumannomycesgraminis；变种类型；致病力测定；2硕士学位论文英文摘要ABSTRACTVarietyIdentificationandPathogenicityDeterminationofGaeumannomycesgra

7、minisofWheatinHenanSupervisor：AssociateProf．WangZhenyueMasterCandidate：XuXiaoAbstract：Wheattake-allisadevastatingdiseaseonwheat．Recently,thediseasecausedseveredamageinhenanprovinceleadingtosignificantyieldlossofwheat．Inordertounraveltheoccurrenceofthepathogen

8、inhenanprovince，samplesshowingtypicalsymptomswerecollectedfromsevenregionsincludingzhengzhou，xuchang，kaifengetc，and74Gaeumannomycesstrainswereisolatedfromthem．Morphological，physiological，