南方小花蝽孤雌生殖的微卫星标记验证

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1、华中农业大学硕士学位论文南方小花蝽孤雌生殖的微卫星标记验证姓名：王小芬申请学位级别：硕士专业：农业昆虫与害虫防治指导教师：周兴苗201206南方小花蝽孤雌生殖的微卫墨标记验证摘要南方小花蝽(OriussimilisZheng)是我国的特有物种，它广泛分布于我国南方农田生态系统中的一种重要的捕食性天敌。国内已有大量的关于南方小花蝽分类学、生物学、及生态学方面的研究报道，但在对于南方小花蝽是否存在孤雌生殖这一生殖方式方面还有争议。为明确南方小花蝽的生殖方式，揭示其孤雌生殖的可能性，本文从室内胁迫环境条件下和分子生物学水平上两个方面系统的研究了南方小花蝽的生殖方式，其主要结果如下：一胁迫

2、环境下南方小花蝽孤雌生殖的发生南方小花蝽在室内饲养时，其繁殖和发育主要受温度、光照、湿度、食物种类和食物丰歉5个因素的影响。本文在室内环境下，将这5个不同因素分别设置5个不同水平，设计正交试验，研究南方小花蝽在室内胁迫环境下的孤雌生殖现象，试验未观察到南方小花蝽处女雌成虫的产卵现象；但是在温度28℃、湿度70％、光照L14：D10，以花粉+棉蚜／蓟马饲养并给以充足的食物来源，将20头南方小花蝽处女雌成虫放在一起饲养时会有产无效卵的现象。二南方小花蝽自然种群孤雌生殖的分子验证根据微卫星位点的侧翼序列高度保守，其部分引物在起源相近的物种中可以通用的特点，本文利用从NCBI上搜索到的与O

3、riussimilisZheng同属小花蝽科的O．strigicollis和0．sauteri共19个微卫星位点对南方小花蝽自然种群的个体基因组分别进行PCR扩增，将扩增的结果进行6％的变性聚丙烯酰胺胶电泳分析，最终筛选出6个最合理的位点并对其PCR体系的配制和PCR扩增程序进行了优化。进入孤雌生殖的卵的有三种不同的发育途径：(1)由卵直接发育成为新个体，其基因型为单倍体；(2)卵以自合的方式恢复二倍体后发育成新的个体，这种方式产生的孤雌生殖后代均为二倍体且其基因型只有两种：纯合-了或者与母体基因型完全一样；(3)卵核不经过减数分裂直接发育成新个体，其基因型与母体完全一样。利用上述

4、筛选到的6个微卫星位点对对南方小花蝽自然种群的个体进行分子水平的研究中没有检测到纯合了的个体也没有至少两个个体在6个微卫星位点上的基因型完全一致的现象。因此本研究没有发现南方小花蝽的孤雌生殖现象。关键词：南方小花蝽；生殖方式；微卫星位点；孤雌生殖AbstractO厂f淞similisZheng(Hemiptera：Anthocoridae)isChina-sendemicspecies，anditisaIl1mpolrtantpredatorwidelydistributeinagroecosystemsofSouthChina．Alotof11terature8we。erepor

5、tedonthetaxology,characteristicsofbiologyandecolgyof0．similisZheng．Butlnwhe吐1ertheparthenogenesisreproductiveisofthereproductivewayofO．j砌加Zheng1scontroversial·InordertogettheknowledgeofthereproductivewavofO．s‘m腑么hengandtorevealthepotentialoftheparthenogenesisreproductivein0．s加船乞neng，servmgaSmd

6、oorstressenvironmentconditionsandthelevelofmolecularbi0109Y．1nthistwoaspectsthispaperhadsystematicallystudiedthereproductivewayof0．similisZheng．Themainconclusionsareasfoliows：JTheparthenogenesisreproductiveofO．similisZhenginindoorstressenvironnlentInthemdoorrearingofO．similisZheng，themianlyfac

7、torsofitsreproductionanddeVeIopmentaretemperature，light,humidity，thevarietyoffoodsandfoodstages．thusWeusethis5factorsdesignedthefivefactorsof5levelsomlogonaItest．InthjstestWeneVerobservedthespawningphenomenonoffemaleQsimilisZheng．Butin锄