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1、课题结题报告结题报告肾早期损伤定位标志物研究重庆三峡中心医院杜红心立项依据研究内容研究结果项目完成情况预实验结果经费来源一、立项依据研究背景妊娠期糖代谢异常：包括妊娠期糖耐量受损（GIGT）和妊娠期糖尿病（GDM）。GIGT：一组已有糖代谢异常并可能向糖尿病发展的病理生理过程的中间阶段。GDM：妊娠期首次发生或发现的不同程度的糖代谢异常。近年的研究表明,GDM与GIGT的总体发病率逐年升高,达7.61%。追踪研究显示30%-50%的GDM患者可在远期发生糖尿病，且有糖尿病家族史者，GDM患病机率增加，提示其有一定的免疫遗传学背景。研究背景妊娠期糖代谢异常对妊娠的影响最常见的是导致
2、巨大儿、胎儿窘迫和新生儿低血糖的发生；以及并发血管病变，增加妊娠期高血压和手术产的发生率。国内外的数据表明：未治疗的GDM孕妇并发症明显增加，且围生儿患病率主要与治疗早晚有关，证明早期筛查、诊断、干预可以降低孕产妇的并发症及围生儿患病率。研究背景妊娠期糖代谢异常的发生与遗传、环境及生活习惯密切相关,近年来国内外的研究表明,某些基因的多态性对妊娠期糖代谢异常的发生可能具有重要作用。如：葡萄糖转运蛋白基因、葡萄糖激酶基因、磺脲类药物受体基因、胰岛素受体底物基因、人类主要组织相容性基因复合体以及钙蛋白酶-10基因、尾加压素Ⅱ基因、肿瘤坏死因子-α基因等均与妊娠期糖代谢异常发病有一定关联
3、。立项依据但是目前已有的研究成果还存在争议,引起疾病的责任基因及其作用机理尚未明确。因此对致病基因的研究已日益成为临床诊疗的迫切需要。探究及筛选与妊娠期糖代谢异常相关的基因多态性,将会对妊娠合并糖尿病、GDM及GIGT的预防、治疗、改善预后及提高广大妊娠妇女围产期的生命质量起到十分积极而重要的作用。同时,对节约医疗资源、提高出生人口质量也将有十分重要的意义。立项依据二、研究内容对葡萄糖转运蛋白基因、磺脲类药物受体基因、人类主要组织相容性复合体基因、钙蛋白酶-10基因、尾加压素Ⅱ基因等五个可能的糖代谢异常相关基因及其相关位点的多态性进行研究，以明晰它们与妊娠期糖代谢异常的发生发展的
4、关系。观察可能与GIGT、GDM及T2DM的发生有关的危险因素。研究内容关键技术或方法1采用酚-氯仿法提取基因组DNA23PCR技术扩增目的基因片段PCR-RFLP方法检测基因型4logistic回归进行数据分析研究对象NGT组GIGT组GDM组T2DM组100例,贵阳医学院附属医院内分泌科100例,贵阳市妇幼保 健院门诊健康体检者各100例,贵阳市妇幼保 健院门诊患者实验方法1.GDM及GIGT的诊断方法（NDDG标准）◆1、50g葡萄糖负荷试验筛查,＞7.8mmol/L为阳性者做糖耐量试验(OGTT)。◆2、OGTT试验：抽血前禁食8～12h,75g葡萄糖溶300ml水中3～
5、5min服完,查空腹及服糖后1、2、3h血糖。两次≥5.8、10.6、9.2、8.1mmol/L者诊断为GDM；两次空腹血糖≥5.8或糖筛≥10.6mmol/L,空腹血≥5.8mmol/L即诊断为GDM。◆OGTT4项中任何一项异常或第2小时≥6.7mmol/L诊断为GIGT。诊断标准2.T2DM的诊断标准（1999年WHO标准）◆糖尿病症状+任意时间血浆葡萄糖水平≥11.1mmol/L或◆空腹血浆葡萄糖(FPG)水平≥7.0mmol/L或◆OGTT试验中，2h-PG水平≥11.1mmol/L诊断标准全血DNA的提取PCR-RFLP、PCR-AFLP凝胶电泳分离收集标本PCR扩增
6、目的片段基因型的判定数据处理实验步骤计数资料：基因频率及基因型频率：计量资料：危险因素采用logistic回归分析百分数描述（X±S）描述，采用t检验Hardy-Weinberg平衡检验；卡方检验，P＜0.05统计学处理数据分析及处理：三、研究结果实验数据及图表：12型:404,372bp11型:372bp22型:404bpCAPN-1019位点多态性分析：CAPN-1043位点多态性分析：GG型:144bpAA型:121,23bpGA型:144,121,23bpCAPN-1063位点多态性分析：CT型:192,162,30bpTT型:192bpCC型:162,30bp相关危险
7、因素分析：单因素logistic回归分析结果相关危险因素分析：多因素logistic回归分析结果 （GIGT组、GDM组与NGT组）相关危险因素分析：多因素logistic回归分析结果 （T2DM组与NGT组）项目完成情况：主要考核指标完成情况：①对7个可能相关的基因及其相关位点的多态性与妊娠期糖代谢异常的关系进行研究，明晰了它们与妊娠期糖代谢异常相关疾病的发生和发展之间的关系；②根据实验室数据及统计结果，我们可以得出以下结论：可能与妊娠期糖代谢异常发病相关目的基因及其位点7个，
