水稻pcd及抗病相关基因spl5的功能分析

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1、万方数据FunctionalanalysisofricePCDandresistancerelatedgeneSPL5ByJinBinADissertationSubmittedtoZhejiangNormalUniversityInpartialFulfillmentoftheRequirementFortheDegreeofMasterofScienceSupervisedbyProfessorBojunMaCollegeofChemistry&LifeScience，ZhejiangNormalUniversityJinhua，321004，China

2、May，2014万方数据本研究由国家自然科学基金(31171519)和浙江省自然科学基金(Z14C130001、LYl3C130008)赞助。ThisWorkWasSupportedbyTheNaturalScienceFoundationofChina(NSFC)andZhejiangProvincialNatllralScienceFoundation万方数据目录目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯IIIAbstract．．⋯．．．．⋯⋯。。⋯⋯．⋯⋯．⋯．⋯⋯．．⋯⋯⋯．⋯．．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯．⋯．⋯⋯．⋯⋯．．．．．．．．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯V缩略表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯VII第一章文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11细胞程序性死亡(PCD)概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12植物类病变突变体(LMM)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．13I．MM的～般特征⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24LMM在PCD研究中的作用．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．34．1鞘脂类LMM在PCD中的作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯34．2Ca+相关LM_M与PCD的联系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯443叶绿体相关LMM在PCD中的作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45植物PCD及抗病信号途径中的信号分子⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯55．1活性氧(ROS)及一氧化氦(NO)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯55．2植物激素⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．75．2．1水杨酸(-SA)信号途径．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．75．2．2茉莉酸(JA)及乙烯(ET)信号途径⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一8‘5．2．3其他激素的作用⋯⋯．：

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．96水稻洲的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯j⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．107RNA剪接及可变剪接⋯⋯⋯⋯。⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯117．1pre—mRNA剪接的基本过程⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯117．2pre．mRNA剪接过程中的剪接因子⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯127．3可变剪接及其生物学功能⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯138本研究的内容和意义⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14第二章水稻刷琵5基因的组织表达分析及亚细胞定位⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯151材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．151．1植物材料⋯⋯■⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151．2质粒和菌株⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151．3水稻SPL5基因的组织表达分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯t51．3，1水稻育苗及取样⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．151．3．2总RNA的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯161．3．3总RNA的纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯161．3，4cDNA第一链的合成⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．171．3．5半定量RT．PCR表达分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．171．3．6实时荧光定量PCR(qPCR)表达分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯181．4水稻口琵5基因的GUS组织化学染色⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．191．4．1．pCAMBIAl300．SPL5pro：：SPL5：GUS表达载体的构建⋯⋯⋯⋯⋯．．191．4．2根癌农杆菌介导的水稻遗传转化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．191．5水稻SPL5基因的亚细胞定位⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2l1．5．1pCAMBIAl300S：：EGFP：

8、SPL5亚细胞定位载体的构建⋯⋯⋯⋯⋯．211．5．