珠子参化学成分及体外抗肿瘤活性研究

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3、于我国西南及陕西、甘肃、安徽、浙江、江西、福建、河南、湖南、湖北、广西、西藏等地。具有补肺、养阴、活络、止血的功效。本论文在实验室前人对珠子参化学成分研究的基础上，利用现代分离色谱手段，从珠子参60％乙醇提取物中分离得到12个化合物，通过理化常数测定、薄层色谱检测和各种波谱学特征(1H．NMR、13C二卜MR)分析，鉴定了7个化合物。分别为：三七皂苷一R2(notoginsenoside．R2)(1)、人参皂苷Rf(ginsenosideRf)(2)、金盏花苷E(caIendulosideE)(3)、太自极木皂苷Ⅳ(taiba

4、ienosideⅣ)(4)、太白楹木皂苷I(taibaienosideI)(5)、齐墩果酸(olea缸cacid)(6)、人参皂苷Ro(giIlsenosideRo)(7)。其中化合物3、4和5为首次从该种植物中分离得到。上述研究成果完善了珠子参的化学成分，并为进一步活性研究提供了物质基础。本论文利用MTT法研究了化合物1、2、3、4、5、7对人源肝癌Hep(汜细胞株、人源肺癌A549细胞株及人源宫颈癌Hela细胞株的体外抗肿瘤活性。结果表明，化合物3、4、5对H印G2、Hela及A549细胞的增值均有很强的抑制作用，而化合物

5、1、2、7均无抑制作用。基于前面的研究成果，我们采用荧光染色、透射电镜、流式细胞术及weStemblot等方法对化合物3(金盏花苷E)抑制人源肝癌细胞HepG2增殖机制进行了研究。金盏花苷E能够有效抑制HepG2细胞增殖，并呈浓度依赖效应和时间依赖效应，在24，48，72h后的IC50分别为0．06167，0．05546和O．05214IlmoI／ml。金盏花苷E处理过的HepG2细胞，变圆，数量减少；荧光染色后，观察其细胞核，出现凝缩和破裂；透射电镜下观察，细胞表面绒毛减少，线粒体发生肿胀，变圆，染色质浓缩成块状，边缘化凝集

6、于核膜上，产生凋亡小体等。以上结果都说明He口G2细胞发生凋亡。通过流式细胞仪检测，金盏花苷E能够阻滞细胞周期于C趁，M期，并能使凋亡细胞数量增加。金盏花苷E对HepG2细胞处理24h后，Procaspase一3，一8，．9均出现一定程度的活化，同时，Bcl一2的表达量明显增加，BaX的表达量明显减少，结果表明，金盏花苷E能够通过激活caspase一3，．8，一9通路和线粒体途径，诱导细胞凋亡。关键词：珠子参，化学成分，抗肿瘤，HepG2细胞，机制StudyontheChemicaIConstituentsandAnti—tu

7、morActivityinVitroofPanacisMajorisRhizomaAbstractPaIlacisM旬orisRhiZomacomes丘．omDriedrhjzomesofRi，斌问印栉岔埘C．A．Mey．VaL腕驷“Burk)C．YWUetK．M．Fengor触却D_『2f船C．A．Mey．Vn6勿f甩九甜驴妣(Seem)C．YwuetK．M．Feng，Ma瑚yiIlthesouⅡ1westofCllillaandShaallxi，GaIlsuAnhui，Zhe!jiaIlg，Ji锄gXi，F哂iall，He

8、nan，HllIlaJl，Hubei，Guan黔i，Tmetandsoon．Inthjs也esis，12coⅡ印ulldswaSis01ated舶m60％emanolextractofPanacisM面orisRhizomabymemodems印arationteclmolo