芬太尼和瑞芬太尼对人肺癌细胞a549细胞活力的影响

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1、河北医科大学硕士学位论文芬太尼和瑞芬太尼对人肺癌细胞A549细胞活力的影响姓名：孟俊青申请学位级别：硕士专业：麻醉学指导教师：邢玉英201203中文摘要芬太尼和瑞芬太尼对人肺癌细胞A549细胞活力的影响摘要目的：肺癌是常见的呼吸道恶性肿瘤，其治疗以手术切除为主；而且晚期癌症患者疼痛剧烈。阿片类镇痛药在癌症患者手术、术后镇痛及癌痛治疗中应用广泛。阿片类镇痛药除镇痛作用外，对癌细胞生长是否产生影响，是促进癌细胞的生长增殖还是抑制不甚清楚。本研究通过探讨芬太尼和瑞芬太尼对人肺癌细胞A549细胞活力的影响，以期为临床应用提供参考。方法：人

2、肺癌A549细胞培养至对数生长期，接种于96孔培养板或75ml培养瓶中，采用随机数字表法，将其随机分为9组：芬太尼组(F1～F4组)分别将芬太尼加入1640培养基中，使芬太尼终浓度分别为O．5、5、50、500ng／ml，瑞芬太尼组(RFl"-'一RF4组)分别将瑞芬太尼加入1640培养基中，，使瑞芬太尼终浓度分别为O．5、5、50、500ng／ml，正常对照组(C组)，加入与其它组芬太尼或瑞芬太尼等容量的1640培养基。(1)各组细胞分别孵育24、48、72h时，采用噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞活力；(2)各组细胞孵育24h，

3、经A肌exinV_FITC／『PI双标记染色后，采用流式细胞仪检测细胞凋亡率；(3)各组细胞孵育24h，经PI染色后，采用流式细胞仪检测细胞周期。结果：l九组人肺癌A549细胞孵育不同时点的细胞活力：九组A549细胞孵育24、48h时细胞活力差异无统计学意义(尸>O．05)。与C组比较，F1组和RFl组孵育72h时细胞活力差异无统计学意义(尸>O．05)。F2"--'F4组孵育72h时细胞活力分别为(O．701+0．045)％、(O．523士0．057)％、(0．40710．062)％，明显低于C组的(1．012+0．173)％；

4、RF2"-'-'RF4组孵育72h时细胞活力分别为(O。758士0．082)％、(0．501+0．102)％、(0．399+0．075)％，明显低于C组的(1．012+0．173)％(尸

5、-2．1)％、(25．1+3．7)％，明显高于C组的(3．7+1．7)％；RF2"--RF4组孵育72h时细胞凋亡率分别为(9．6+1．5)％、(17．1+2．3)％、(23．84-4．9)％，明显高于C组的(3．7+1．7)％(尸<0．05)。与C组比较，F2"-'F4组和RF2"-'RF4组人肺癌A549细胞凋亡率升高，并且呈剂量依赖性关系(尸<0．05)。3九组人肺癌A549细胞周期分布：与C组比较，F1组和RFl组S期的比例和G2／M期比例差异均无统计学意义(尸>O．05)。F2"--'F4组S期的比例分别为(35+4)％

6、、(304-5)％、(24士3)％，明显低于C组的(404-5)％：G2／M期的比例分别为(8．404-1．02)％、(13．124-2．05)％、(18．21+2．73)％，明显高于C组的(1．38+0．13)％(尸

7、组和RF2"--'RF4组人肺癌A549细胞S期比例减少，停滞在G2／M期的比例增加，并且呈剂量依赖性关系(尸<0．05)。4等效镇痛浓度的芬太尼组与瑞芬太尼组比较细胞活力、细胞凋亡率、S期比例和G2／M期比例，差异均无统计学意义(胗0．05)。结论：芬太尼和瑞芬太尼浓度≥5ng／ml时，均可剂量依赖性抑制人肺癌细胞A549细胞活力且抑制效应相似，其机制与诱导细胞凋亡，使细胞停滞于G2／M期可能有关。关键词：芬太尼；瑞芬太尼；细胞系，肿瘤；细胞凋亡；细胞周期；细胞存活；流式细胞术英文摘要Effectsoffentanylandre

8、mifentaniionviabilityofhumanlungcancercelllineA549ABSTRACTObjectt‘ve：Lungcancerisacommonrespiratorytractmalignancywhichcanbe