不同孔径丝素蛋白材料体内降解的初步研究

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1、复旦大学硕士研宄生学位论文论文题目不同孔径丝素蛋白材料体内降解的初步研究Apreliminaiystudyondegradationbehaviorsofsilkfibroinscaffoldswithdifferentporesizesinvivo研宄生姓名：千建峰学科、专业：耳鼻咽喉科学部系：华山医院导师：赵霞主任医师导师组成员：亓卫东副主任医师陆艳主治医师蔡丽慧住院医师基金资助：2010上海市科委纳米专项基金1052nm038012012年4月目录一、中文摘要1不同孔径丝素蛋白材料体内降解的初步研究Aprelimin

2、arystudyondegradationbehaviorsofsilkfibroinscaffoldswithdifferentporesizesinvivo三、缩略语6四、正文1、tilS72、材料与方法103、实验结果164、讨论265、结论306、参考文献31五、文献综述丝素蛋白材料生物降解性的研宄进展34六、附录1、研究生期间发表的论文及科研成果422、致谢43_瘼SA學复旦大学2012年临床硕士研究生毕业论文中文摘要不同孔径丝素蛋白材料体内降解的初步研究目的本实验旨在通过观

3、察不同孔径丝素蛋白支架在SD大鼠体内不同时间点的降解情况，初步了解不同孔径丝素蛋白材料在体内降解过程中的形态学特点，研宄丝素蛋白材料的结构对其体内降解的影响，为深入研宄丝素蛋白材料体内降解的可控性奠定实验基础。材料与方法1.制备三种丝素蛋白膜，平均孔径分别为20±1.5nm(SF-1)、100±8^m(SF-2)、200±15pm(SF-3),平均孔隙率分别为86.8±0.2%(SF-1)、92.4±0.1%(SF-2)、96.6±0.1%(SF-3)，扫描电镜观察其表面结构。2.选用体重相当的SD大鼠，全麻下在其脊柱两侧

4、共作3个长约Ion的小切口，潜行分离，每只SD大鼠形成3个皮下囊状腔隙，随机分别植入SF-1、SF-2、SF-3。3.术后选取2，6，12,18,24及30周六个观测时间点，随机取材，分别进行大体观察、组织病理切片HE染色、Masson染色、扫描电子显微镜观察。结果1.大体标本观察可见，SD大鼠术区均无感染、坏死，伤口愈合好。整个实验过程中，SF-1与周围组织轻度粘连，易于分离，材料体积及外形无明显变化；SF-2术后第6周开始发现材料变薄，部分降解，从12周到30周材料与周围皮下组织粘连紧密，30周降解约40%;SF-3术

5、后第2周出现降解，12周降解约50%，24周时基本找不到单纯材料存在，30周己完全降解。2.组织病理切片HE染色：SF-1：术后2周，材料表面可见巨噬细胞及较多中性粒细胞浸润，术后6周幵始炎性细胞明显减少，在整个实验过程中丝素蛋白支架与周围组织界限清楚，内部未见组织长入。SF-2：术后2周，材料表面发现有成纤维细胞浸润生长，周围组织呈增生性改变.可见炎性细胞浸润，以淋巴细胞和巨噬细胞为主，偶可见新生血管形成。随着时复旦大学2012年临床硕士研宄生毕业论文间延长，炎性细胞减少，成纤维细胞增多，同时可见血管、组织细胞进一步长入材

6、料。SF-3：术后2周与SF-2在2周时表现基本相同，但材料表面组织细胞浸润较深:术后6周，材料内部部分区域嗜伊红染色消失，支架结构有崩解现象，炎性细胞明显减少，可见较多血管及成纤维细胞，成纤维细胞等组织细胞逐渐深入材料内部生长；术后12周，可见较多成熟血管及成纤维细胞，材料边缘部分区域支架结构崩解现象较前明显，出现较大孔径，但内部变化不大，组织细胞进一步长入材料，但组织增生现象仍较明显；术后18周与12周所见基本相同，组织细胞进一步长入材料；术后24周，材料支架结构完全崩解，见不到正常材料结构，组织细胞与剩余材料混合存在，

7、无明细界限。3.Masson三色染色：SF-1周围组织纤维化，整个观察周期内未见胶原纤维长入材料内部；SF-2在18周时可见较多胶原纤维深入材料内部，30周时可见整个残余材料被胶原纤维包绕；SF-3在2周时可见边缘结构模糊，周围被胶原纤维包绕，6周时可见大量胶原纤维组织深入内部生长，血管丰富，24周时可见大量胶原纤维将残余丝素蛋白支架分区包绕。4.扫描电子显微镜（SEM)观察：SF-1在18周时可见表面出现孔径塌陷，但直到30周，未观察到材料断面结构有新的变化；SF-2在2周时材料孔内出现组织细胞，12周时孔径变大，部分孔

8、径塌陷，较多组织细胞长入，24周时整个断面结构塌陷；SF-3在2周时表面可见片状材料碎屑及孔径塌陷，局部孔径增大，断面结构未见明显变化，12周表面孔径完全塌陷，可见较多组织细胞长入，24周时已找不到正常材料结构。结论1.不同孔径、孔隙率的丝素蛋白支架体内降解速率不同。2.三种丝素蛋白支架体