烟草中嘧肽霉素残留的分析方法和消解动态的研究

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1、山东农业人学伞

2、1制硕i：专业学位论文中文摘要植物内生真菌是那些在其生活史的一定阶段或全部阶段生活于健康植物的各种组织和器官内部、不引发植物产生明显病症的真菌。因为能够产生次生代谢类物质防治植物病害，现已成为生物防治中重要的生防因子。本研究以杨树内生真菌球毛壳(Chaetomiumglobosum)ND35为供试菌株，通过液体培养发酵经过有机溶剂萃取得到其次生代谢产物粗提液，并通过薄层层析初步分离其活性组分。利用粗提液及分离组分进行了对玉米小斑病菌、黄瓜灰霉、辣椒疫霉的室内抑菌检测，孢子萌发抑制试验。试

3、验结果显示：1．不管是粗提物还是分离组分都具有良好的抑菌效果，随着浓度的增加抑制效果逐渐增强。浓度为4．0mg／ml时粗提液对玉米小斑病菌的抑菌率是40．4％，对黄瓜灰霉的抑菌率是32．8％，对辣椒疫霉的抑菌率是28．5％，浓度为4．0mg／ml的组分A、B对玉米小斑病菌的抑菌率分别是37．8％％、42．2％，对黄瓜灰霉的抑菌率分别是42．8％、51．6％，对辣椒疫霉的抑菌率分别是34．8％、25．0％。2．显微观察经处理后的培养基内的病原菌菌丝，发现玉米小斑病菌、黄瓜灰霉、辣椒疫霉菌丝与对照相比明显膨

4、大畸形，分叉增多，菌丝缩短，辣椒疫霉的对照组基内菌丝因为受丙酮影响也发生变化。3．对玉米小斑病，黄瓜灰霉病，辣椒疫病的病原菌孢子萌发抑制试验发现，粗提物及分离组分对孢子萌发都具有明显的抑制作用，玉米小斑病的分生孢子萌发后芽管膨大，分叉增多，不同浓度的处理液影响芽管伸长的长度。当处理液浓度为4×10五mg／ml时黄瓜灰霉的分生孢子部分能正常萌发，当处理液浓度为4．0mg／ml时，各个处理的抑制率为100％。辣椒疫霉的游动孢子对代谢产物也非常敏感，部分孢子发生溶解现象。4．利用球毛壳ND35的发酵过滤液及粗

5、提液对玉米小斑病，黄瓜狄霉病，辣椒疫病进行温室防病试验，试验结果显示，发酵液对玉米小斑病的防治效果为75．8％，对黄瓜灰霉的防治效果为49．1％，对辣椒疫霉的防治效果为43．6％，不同浓度的粗提液其防治效果不同。随着浓度增加防治效果逐渐增强，当处理液浓度为2．5mg／ml时，对玉米小斑病的防治效果为35．5％，对黄瓜狄霉病的防治效果为56．0％，对辣椒疫病的防治效果为42．2％。5．通过对球毛壳ND35次生代谢产物抑菌成分的液相检测条件进行优化，得到最佳检测条件是，进样量20“l，流速2ml／min，流

6、动相中乙腈与水的比例是65：35。并根据l球毛壳ND35姿生!!塑主塑竺堕堕堡旦坠垦重丝壁坌竺坚!兰竺丝型釜竺垡垡一——_—————————————_————————————————————————一粗提物C及分离组分A、B的液相色谱图推测出A、B的出峰时间，B可能是一个混合物，含有两个峰。将A、B所含的峰进行分离，然后进行抑菌验证，证明其具有抑菌活性，为各个峰的分离鉴定奠定基础。关键词：球毛壳ND35；次生代谢物；抑菌检测：温室防治效果；HPLC检测nAbstractEndophyticfungiis

7、existedinthevarioustissuesandorgansofpyphaeplantsinsideatacertainstageofitSlifehistoryorallofthestages．whichdoes’tcausesignificantsymptomofplantdiseases．Becauseitisabletoproducesecondarymetabolitestocontrolplantdiseases，nowitisservingasanimportantbiologi

8、calcontrolagent．Inthisstudy,theendophytiefungusChaetomiumglobosumND35wasisolatedfromhealthyplantsPopulustomentosa．Thecrudeextractsofsecondarymetaboliteswereobtainedbyliquidfermentationaftertheorganicsolventextraction．Thenpreliminaryseparationofactivecomp

9、onentsweregoaenbyTLC．AntifungalactivitiesandthesporegerminationwereinvestigatedwiththecrudeextractsandfractionsonpathogenicBipolarismaydis，Botrytiscinema，PhytophthoracapsicLTheresultshowedthat：1·boththecrudeextractsandfrac