橘小实蝇rpl19 dsrna对橘园非靶标昆虫干扰效应研究

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1、分类号密级华中农业大学硕士学位论文橘小实蝇rpll9dsRNA对橘园非靶标昆虫干扰效应研究TheeffectsofRNAinterferencetargetingBactroceradorsalisds-BdrpH9onthegeneexpressionofrpH9innon-·targetinsects研究生：陈爱娥学号：2011301110231指导老师：张宏宇教授专业：农业昆虫与害虫防治研究方向：昆虫分子生物学获得学位名称：农学硕士获得学位时间：2014年6月华中农业大学植物科学技术学院二零一四年六月华中农业大学学位论文独

2、创性声明及使用授权书学位论文是否保密爹如需保密，解密时间独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成集，也不包含为获得华中农业入学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。研究生签名：懒破时间：>口甲年多胃≥曰学位论文使用授权书本入完全了解“华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定”，即学生必须按照学

3、校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交沦文的印刷版和电子版，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、}E编学位论文。本人同意华中农业大学可以用刁i同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。注：保密学位论文在解密后适用于奉授权书。学位敝储魏陬积翮虢懒签名日期：为伸年6月≥同签名日期：W咿年易月弓日注：请将本表直接装订在学位论文的扉页和目录之问橘小实蝇，∥19dsRNA对橘园非靶标昆虫干扰效应研究目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一iAbstr

4、act．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．iii第一章文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一11RNAi．．⋯．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．⋯⋯．．．．．．．．．．．⋯．⋯．．．．．．⋯⋯．．⋯．．．⋯．⋯12RNA

5、干扰技术在昆虫中的应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l2．1dsRNA导入昆虫的方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．I2．2昆虫对RNAi的敏感度⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．32．3RNAi在昆虫基因功能中研究现状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32．4RNAi在害虫防治中的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43Rpll9基因的功能研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．54橘小实蝇防治研究现状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯55橘园昆虫群落研究⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．66本研究内容与目的意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯86．1研究内容与目的意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯86．2技术路线⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9第二章柑橘大实蝇、意大利蜜蜂、长尾潜蝇茧蜂rpll9基因全长克隆⋯⋯⋯⋯．．10l材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯101．1材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯101．1．1供试昆虫⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯101．1．2常用缓冲液、培养基及抗生素的配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．101．1．3主要试剂及试剂盒⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1l1．1．4主要实验仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯121．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯121．2．1总RNA的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．121．2．2简并引物扩增柑橘大实蝇、长尾潜蝇茧蜂rpll9基因片段及基因克隆．13l。2．3RACE扩增柑橘大实蝇、长尾潜蝇茧蜂、意大利蜜蜂

8、3’端⋯⋯⋯⋯⋯151．2．4RACE扩增柑橘大实蝇、长尾潜蝇茧蜂、意大利蜜蜂5’端⋯⋯⋯⋯⋯172结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2l华中农业大学2014届硕士研究生学位(毕业)论文2．1总RNA的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯