基于纳米材料和环糊精新型dna电化学生物传感器的研究

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1、华东师范大学博士学位论文基于纳米材料和环糊精的新型DNA电化学生物传感器的研究姓名：常竹申请学位级别：博士专业：分析化学指导教师：何品刚;方禹之20080501学位论文独创性声明本人所呈交的学位论文是我在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果．据我所知，除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果．对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确说明并表示谢意．作者签名：!量笪日期：学位论文授权使用声明．》嘏．蔓．∞本人完全了解华东师范大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留学

2、位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版．保密的学位论文在解密后适用本规定。学位论文作者签名：l第竹导师签名：日期：逊』：塑坼哆摘要基于纳米材料和环糊精的新型DNA电化学生物传感器的研究随着基因的结构与功能的研究不断深入，特别是人类基因组计划(HGP)的发展，基因的分离及分析检测在卫生防疫、医学诊断、药物研究、环境科学及生物工程等领域发挥着越来越重要的作用。许

3、多新的生物技术的开发，为发展高灵敏度、高特异性的生物分析检测方法注入了活力，其中利用DNA分子间的特异性互补配对规律发展起来的各种DNA生物传感技术，引起了国内外生物分析工作者的广泛关注。电化学DNA检测方法以其灵敏度高、轻巧便宜、携带方便、耗能少、能与现代微电子技术联用，易于实现微型化等优点，受到了研究者们的广泛关注，俨然成为当今生物学、医学领域的前沿性课题。纳米技术的出现为纳米材料在分析化学领域的发展和应用开辟了新的思路。纳米颗粒的比表面积大、表面反应活性高、催化效率高、吸附能力强等优异性质，在催化、光吸收、生物医药、磁

4、介质及新材料等方面得到了广泛的应用，为生物医学研究提供了新的研究途径，同时也推动了化学和生物传感器的迅速发展。纳米粒子的独特性质与生物分子杂交反应和电化学检测方法相结合，使其应用范围更加广阔(例如：纳米生物电子)。纳米粒子生物分子连接可能用于DNA疾病的诊断，并且对生物分析化学产生巨大的影响。超分子化学是基于分子间的非共价键相互作用而形成的分子聚集体化学，在与材料科学、生命科学、信息科学、纳米科学与技术学科的交叉融合中，超分子化学已发展成为超分子科学。并成为创造新物质、实现新功能的一种新的重要途径，被认为是2l世纪新概念和高

5、技术的重要源头之一。环糊精作为超分子化学的重要主体化合物以其独特的性质而倍受关注。对它的研究也逐渐从主客体识别形成包合物的机理转移到对其在分析化学、医药、环境保护和传感器等领域的应用研究中。‘本论文的主要创新之处就是将纳米技术、层层组装技术、超分子包合作用等与电化学分析技术相结合用于核酸分子杂交或凝血酶蛋白的分析检测，研制具摘要有高灵敏度高选择性的新型电化学生物传感器，成功地应用于对特定序列DNA片断的选择性测定和对DNA链中的碱基尤其是单个碱基突变的快速、灵敏和准确的识别，为基因的快速分析测定提供了一种简便、快捷、廉价的检

6、测装置。第一章绪论首先系统介绍了DNA生物传感器及其研究进展。介绍了DNA生物传感器的原理(包括DNA探针及其分子识别原理和DNA在固体基质表面的固定化)和分类(包括电化学DNA生物传感器，压电DNA生物传感器及光学DNA生物传感器)，其中着重介绍了电化学DNA生物传感器的原理和研究进展，叙述了DNA电化学传感器在基因检测等方面的应用，对今后的发展方向和趋势进行了展望。接着介绍了纳米材料在生物传感器中的一系列应用。最后阐述了本论文的目的和，意义，指出论文的创新之处及主要研究内容。第二章基于纳米颗粒Si02包裹Ru(bpy)2

7、+标记的DNA电致化学发光生物传感器研究首次以Si02包裹Ru(bpy)32+标记DNA分子，制备成高效的电致化学发光探针，实现对目标DNA的高灵敏度特异性识别。我们合成了Si02包裹RuCoPY)32+核壳式纳米颗粒，以此作为新型的ECL标记物。利用一个纳米颗粒中可包裹多个RuCopy)32+分子来达到放大ECL信号的目的，为分析检测更高的灵敏度。根据DNA的碱基互补配对原则、核酸适配体对蛋白质的特异性识别能力，采用Ru(bpy)32+-Si02纳米颗粒作为标记物设计ECL生物传感器，希望能将ECL方法、纳米颗粒带来的高灵

8、敏度与生物识别的高特异性进行有机的结合，实现对DNA序列以及蛋白质进行高灵敏、高特异性的研究分析。第三章基于钯纳米粒子／碳纳米管增强的DNA电化学生物传感器研究首次将钯纳米颗粒与羧基化碳纳米管结合用于DNA生物传感器的研究，借助钯的良好催化活性和碳纳米管的较大的比表面积、极强的导电性等实现