小盐芥hkt1基因家族的结构和表达研究

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1、分类号：密级：学校代码：10165学号：20111223蓬掌师耗大学硕士学位论文小盐芥HKTl基因家族的结构和表达研究作者姓名：邵琳学科、专业：植物学研究方向：植物分子细胞生物学导师姓名：王火旭副教授2014年3疑学位论文独创性声明㈣lIIIIqlllllJllI!IIIIIIIUlIIlY2613589本人承诺：所呈交的学位论文是本人在导师指导下所取得的研究成果。论文中除特别加以标注和致谢的地方外，不包含他人和其他机构已经撰写或发表过的研究成果，其他同志的研究成果对本人的启示和所提供的帮助，均己在论文中做了明确的声明

2、并表示谢意。学位敝储魏堡墼学位论文版权的使用授权书本学位论文作者完全了解辽宁师范大学有关保留、使用学位论文的规定，及学校有权保留并向国家有关部门或机构送交复印件或磁盘，允许论文被查阅和借阅。本文授权辽宁师范大学，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库并进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，并且本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。保密的学位论文在解密后使用本授权书。学位论文作者签名：二蜀串指导教师签名：签名日期：押中年2；月易日辽宁师范大学硕士学位论文摘要盐胁迫是世界上大多数国家和地

3、区在农业生产上一直存在的问题，它极大威胁着植物的生长和发育以及世界各国的农业生产。十字花科的小盐芥是与模式植物拟南芥亲缘关系较近的极端耐盐植物。通过对小盐芥基因组测序的分析，发现小盐芥基因组中HKTl基因包括三个成员，均与拟南芥的HKTl基因具有很高的同源性。本研究以小盐芥为材料，研究小盐芥中HKTl基因的多拷贝数现象与小盐芥耐盐的可能相关性。将小盐芥TsHKTl三个成员的氨基酸序列分别与AtHKTl的氨基酸序列进行同源性比较，结果发现小盐芥TsHKTl三个成员(TsHKTls)和AtHKTl氨基酸序列相似性均超过80

4、％。通过对TsHKTls和AtHKTl基因组中内含子的分析发现TsHKTls和AtHKTl基因组中均含有2个内含子，但内含子的长度有很大差异。对TsHKTl三个成员和AtHKTl基因启动子中顺式作用元件的分析表明，小盐芥HKTl基因启动子所含有的非生物胁迫相关的顺式作用元件，在种类和数量上都高于拟南芥的HKTl基因，而小盐芥中TsHKTla启动子所含有的顺式作用元件的种类和数量明显高于TsHKTlb和TsHKTlCo通过RT．PCR和Northernblot等方法对小盐芥TsHKTls基因在盐胁迫条件下表达情况进行了分

5、析，结果显示，在盐处理后，小盐芥中TsHKTla和TsHKTlb基因的表达量有明显升高，而TsHKTlc基因的表达量并没有明显变化。对小盐芥和拟南芥植株进行根和地上部分分别取样进行Northem分析，结果显示，在盐处理下，TsHKTla的地上部分的表达量上调，而拟南芥的根中和地上部分的HKTl表达量都明显的下调，与小盐芥的结果相反。对连有标记基因GUS的小盐芥TsHKTls三个启动子的转基因植株进行GUS组织化学染色分析，结果显示TsHKTla、lb、lc在拟南芥生长中的各时期的不同组织中均有表达，但表达强度不同，Ts

6、HKTla在拟南芥生长中的每个时期的每个组织中的表达量均高于TsHKTlb和TsHKTlc，而三者中TsHKTlc的表达量最低。对盐胁迫和ABA处理下TsHKTls基因启动子的活性的研究发现，TsHKTla在转基因幼苗中的表达量在各个组织中有明显提高，TsHKTlb在幼苗根中表达量有明显提高，TsHKTlc的表达量没有明显变化，说明TsHKTls的三个成员的表达对盐胁迫和ABA有不同的响应。三个成员在拟南芥中的表达与它们在小盐芥中存在相关性。关键词：小盐芥；HKTl；耐盐；启动子小盐芥册基因的功能研究TheStruct

7、ureandExpressionAnalysisofHKTlgenefromThellungiellasalsugineaAbstractSaltstressiSaworldwideproblemofthemostcountiesandregions．ithasbeenexistedandgreatlyaffectsplantgrowthanddevelopmentandagriculturalproduction．Thellungiellasalsuginea，aclosegenusofthemodelplantAr

8、abidopsis，isatypicalhalophytewithhighsalttolerance．ThreemembersofHKTigene，highlyhomologywithArabidopsis，werefoundfromsequencingdatabaseofThellungiellasa厶ugineagenome．