生化室操作作业指导书

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1、生化室操作指导书文件编号：第一版编制：田审核：批准：生效日期：2007年8月8日省立医院西院检验科目录序号主题内容代号页号1血清丙氨酸氨基转移酶测定2血清天门冬氨酸氨基转移酶测定3血清总蛋白液体双缩脲法测定4血清白蛋白溴甲酚绿法测定5血清葡萄糖己糖激酶法测定6血清甘油三酯酶试剂法测定7血清总胆固醇酶试剂法测定8血清高密度脂蛋白胆固醇测定9血清尿酸TBHBA法测定10血清尿素氮谷氨酸测定11血清肌酐苦味酸法测定12血清钙测定13血清氯测定14血清总胆红素测定15血清直接胆红素测定16血清α-淀粉酶测定17脑脊

2、液、尿液微量蛋白测定18血清钾测定19血清磷测定20血清胆碱酯酶测定21血清碱性磷酸酶测定22血清γ-谷氨酰转移酶测定23血清乳酸脱氢酶测定24血清胆碱酯酶测定25血清肌酸激酶测定26血清肌酸激酶同工酶测定27血清二氧化碳结合力测定28血清总胆汁酸测定29血清β2-微球蛋白测定30血清低密度脂蛋白胆固醇测定31血清脂蛋白（a）测定32血清钠测定33343536血清丙氨酸氨基转移酶测定1.实验原理国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。ALTLDH（乳酸脱氢酶）L-丙氨酸+a-酮戊二酸丙酮酸+L-谷

3、氨酸丙酮酸+NADH+H+L-乳酸+NAD++H2O上述偶联反应中，NADH的氧化速率与`样品中ALT的活力成正比,在340nm处NADH呈现特性吸收峰，而NAD+则没有。因此，可在340nm监测吸光度的下降速率（-△A/min）,计算出ALT的活性单位。2.标本：2.1病人准备：12小时禁食。2.2类型：血清，肝素或EDTA血浆。3.标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<10%；15～25℃保存：<17%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定4周。4.标本运输：常温条件下保存运输。5.标本拒收标准：标

4、本溶血、细菌污染的标本。6.实验材料6.1试剂欧泰克ALT测定试剂盒6.1.1试剂组成Tris缓冲液pH7.480mmol/LL-丙氨酸800mmol/LLDH（乳酸脱氢酶）≥1200U/La-酮戊二酸18mmol/LNADH0.18mmol/L6.1.2试剂准备：试剂为即用式。6.1.3试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。6.1.4变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。6.1.5注意事项：试剂中含叠氮

5、钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。6.2校准品：使用罗氏公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。6.3质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。7.仪器：日立7060生化分析仪8.操作步骤8.1项目基本参数：参见生化检验日立7060生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见生化检验日立7060生化分析仪操作规程.SOP文件9.检验结果的判断与分析10.质量控制：在每一批标本中都应把非定

6、值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11.计算方法：以罗氏复合校准品ALT校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。12.参考值范围[4]女性<31U/L男性<41U/L13.临床意义[1,2]：丙氨酸氨基转移酶（ALT）旧称谷丙转氨酶（GPT），天门冬氨酸氨基转移酶（AST）旧称谷草转氨酶（GOT）。它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨基从

7、氨基酸转移给a-酮酸的反应。ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝组织损害等都有关。因此同时进行ALT和AST的检测，可用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/ALT比率用于肝病的鉴别诊断。比率<1预示中度的肝损伤；比率>1和严重肝病有关，常见慢性肝病。14.线性范围4～800U/L15.超出范围结果处理本法对ALT活力检测的最大ΔA/min在340、334nm为0.16,在365nm为0.08。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1

8、：9稀释，重新测定，结果乘以10。16.病危报警值的处理：复查后电话通知临床。血清天门冬氨酸氨基转移酶测定1.实验原理：国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法，酶偶联反应式为：L-天门冬氨酸+a-酮戊二酸AST草酰乙酸+L-谷氨酸草酰乙酸+NADH+H+MDH苹果酸脱氢酶L-苹果酸+NAD++H2O在340nm波长下，监测NADH的氧化速率，即吸光度的下降速率与AST活性呈正比。2.标本：2.1病人准备