小麦atg8基因在植物抵抗逆境胁迫中的功能研究

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1、万方数据分类号：Q窆垒2：鱼密级：公Ⅱ单位代码：!Q鲣鱼学号：2Q!!Q22小麦么粥8基因在植物抵抗逆境胁迫中的功能研究Studyonthefunctionsof死一册艿geneintheprocessofplantresistingstresses学位申请人：指导教师：学科专业：学位类别：授予单位：答辩日期：田丽娟王冬梅教授细胞生物学理学硕士河北农业大学二。一四年五月三十一日万方数据独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含

2、为获得塑耋垦盎些盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：仞乃羹鋈1蓁睇；骶l耄捅霪鏊冀襄羹薹蓁羹蠢嚣羹羹襄震熏薹帮霪雾萋祠镐嚆荡蓁鹳薹薹蓁羹萋羹薹掰琵葵薹：魁警誉r蛰臀器陵器i妊蘸翳霎咎篓錾髑绣睚j羹mI丰f!罐礴羹敷赫器剖鋈％谴锺謦}强硪橱矧澎鞘羹霜基回i醯型殁鞋薹薹

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7、选沉淀，此液体用于转化拟南芥。(3)将拟南芥的花序浸入转化介质液体lmin。(4)同样的方法每隔一周做一次，共三次。2．4．2转基因种子的收获以及转基因苗的筛选与鉴定待上述转化的拟南芥种子成熟后，所收的种子为To代。To代种子经消毒处理后，散种于含12．5gg／mL浓度的潮霉素MS培养基上。12—14d后，Tl代转基因阳性植株长出真叶，而非转基因植株不能长出两对真叶，最终不能成活。Tl代转基因阳性植株移入蛭石继续培养，所收种子为Tl代。将Tl代种子播种在含潮霉素的MS培养基上，选择3：1分离比的T2植株，提取T2植株叶片RNA，反转录为cDNA，通过TaATG8万方

8、数据摘要自噬是广泛存在于真核细胞中对损伤的细胞器和长寿命蛋白进行降解的一条途径，在饥饿、氧化胁迫、干旱、盐、病原菌侵染等逆境条件或细胞分化、细胞死亡和衰老等过程中，对于维持细胞代谢平衡及正常生长发育和环境适应等有十分重要的作用。本实验室前期工作初步证明小麦自噬降解途径的两个核心蛋白ATG6和ATG8参与了小麦抵抗叶锈菌侵染过程。在此基础上，本试验以拟南芥野生型和口郴突变体为材料，通过构建真核表达载体，运用农杆菌浸花法转化拟南芥获得超表达删孔粥的阳性纯合体植株，进一步通过非生物胁迫(干旱、盐、ABA、营养匮乏)与生物胁迫(白粉菌侵染)试验揭示小麦彳粥8在植物抵抗逆境中

9、的作用；通过对生物量的统计阐明小麦彳粥8在植物生长发育中的作用。获得的主要结果如下：1、从小麦幼苗叶片中≥蛩贱霉鹱鍪蓁鞲氧华南磊i琴；精唐

10、科I孑渤每晦殓匿i塞篓萋耋亍镢麓篓萋事鳓毹岛研韵#胁算垂麓罂二磕型篱歪童营：薹

11、雩霪÷巯隔命瞻熬稀搓操牯苄靠裂畏冀耋科赫耋簸《颡鳞潮甏荔霉惹蔫甄掣蓼薹萋藿冀薹蕊鬟芬!嘉翼甏铂妯鲥澎啊鼍鳓蚜习怂薹薹委鬻蓁彰蕊篓垂季巍越薹霎F_副￡割篱；蠢薹薹翼萎奏耄需秦鬣薹封芥；踟蕾范囊；互；剩剑羹堑蓁蜜薹Ⅶi奏甏堡一鍪鬻銎霄霉烈增黪蟛i群黜驻a,4TG8的拟南芥种子播种于MS培养基}=，在温室中正常条件下竖直培养4d。每种基因型的拟南芥幼苗选取

12、4棵长势相同幼苗移栽到不同处理的MS逆境培养基上，呈一条直线，每种逆境均进行3次生物学重复试验。将移栽好的培养皿放于温室中竖直培养，注意每天交换培养皿的位置，防止位4旨效应可能对试验结果产生影响。生长14d后，观察幼苗生长영"x万方数据studyonthefunctionsof刚7’G8geneintheprocessofplantresistingstressesCandidate：TianLijuanSupe州sior=Pr0融sorwangDonglTleiSpecialty：CellBiolog)rAbstractAutophagyisade孕adation

13、pathwayford锄agedorgaJlellesaIld10ng-lifeproteinwjdelyexistsineuka叫oticcell，jtp】aySa嘶ticalmleinmaintainingcellmetabolicbalance，no肌al伊owtha11ddeVelopmenta11denViro啪entalad印tationd谢ngmethestressconditionsuchashunger’oXidation，drou曲t，salt，pathogeninfection，ortheprocessofcelldi脓entiation，