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时间:2019-02-27
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1、《食用菌生产技术》实训指导教材 实训一食用菌形态结构观察一、目的要求观察食用菌菌丝体的生长状态,利用显微镜认识食用菌的营养体和繁殖体的微观结构,利用徒手切片观察食用菌子实体的微观结构,通过对食用菌子实体形态特征的观察,让学生们了解和熟悉各种食用菌子实体的类型和特征,并能根据子实体的外形进行分类。二、实训准备1、材料平菇、香菇、双孢蘑菇、草菇、金针菇、木耳、银耳、猴头菇、灵芝、密环菌、羊肚菌、虫草、茯苓等食用菌子实体或菌核浸浸标本或干标本、鲜标本及部分食用菌的菌丝体,担孢子等。2、仪器工具光学显微镜
2、(100~600倍)、接种针、无菌水滴瓶、染色剂(石炭酸复红或美蓝等)、酒精灯、75%酒精瓶、火柴、载玻片、盖玻片、刀片、培养皿、绘图纸、铅笔等。三、内容和方法步骤(一)菌丝体形态特征观察1、菌丝体宏观形态观察。①观察平菇、草菇、金针菇、木耳、银耳及香灰菌、蘑菇、猴头、灵芝等食用菌的试管斜面菌种或PDA平板上生长的菌落,比较其气生菌丝的生长状态,并观察菌落表面是否产生无性孢子。②观察菌丝体的特殊分化组织:蘑菇菌柄基部的菌丝束;密环菌的菌索;茯苓的菌核;虫草等子囊菌的子座。2、菌丝体微观形态观察。①
3、菌丝水浸片的制作:取一载玻片,滴一滴无菌水于载片中央,用接种针挑取少量平菇菌丝于水滴中,用两根接种针将菌丝拔散。盖上盖玻片,避免气泡产生。②显微观察:将水浸片置于显微镜的载物台上,先用10倍的物镜观察菌丝的分支状态,然后转到40倍物镜下仔细观察菌丝的细胞结构等特征,并辩认有无菌丝锁状联合的痕迹。(二)子实体形态特征观察1、子实体宏观形态观察。仔细观察各种类型的食用菌子实体的外部形态特征,并比较各种子实体的主要区别,特别注意菌盖、菌柄、菌褶(或菌孔、菌刺)、菌环、菌托的特征,并对之进行比较、分类。2
4、、子实体微观形态观察。①菌褶切片观察:取一片平菇菌褶置于左手,右手持刀片,横切菌褶若干薄片漂浮于培养皿的水中,用接种针先取最薄的一片制作水浸片,显微观察平菇担子及担孢子的形态特征。②有性、无性孢子的观察:灵芝担孢子水浸片观察;羊肚菌子囊及子囊孢子水浸片观察;草菇厚垣孢子水浸片观察;银耳芽孢子水浸片观察(以上各类孢子的观察可用标本片代替)。四、作业1、描述菌丝体的生长状态,并画出所观察菌丝、无性孢子、担子及担孢子的形态结构图。2、列表说明所观察各种类型的食用菌子实体的形态特征,如:伞状、头状、耳状、
5、花絮状、肾状、扇状、蛋形、钟形等。3、绘制一种食用菌子实体的形态图,用绘图笔或钢笔(黑)绘制生物图,要求图形真实、准确、自然,画面整洁。实训二食用菌母种培养基的配制一、目的要求了解高压蒸汽灭菌锅的构造,了解食用菌母种培养基的配方,熟悉高压蒸汽灭菌锅的使用方法,掌握母种培养基(PDA或PSA)的配制方法二、实训准备1、配制培养基材料马铃薯、葡萄糖(或蔗糖)、琼脂、水等。2、仪器用具高压蒸汽灭菌锅(手提式或立式)、可调式电炉、铝锅(20cm)、汤勺、切刀、切板、量杯、纱片、漏斗(带胶管和玻璃管)、止水
6、夹、漏斗架、试管(18mm×180mm或20mm×200mm)、1cm厚的长形木条(摆放斜面时垫试管用)、棉花(未脱脂)、捆扎绳、标签、天平等。三、 内容和方法步骤(一)母种培养基(PDA或PSA)配方马铃薯200g,葡萄糖(或蔗糖)20g,琼脂15~20g,水1000ml,pH自然。(二)母种培养基配制1、熬制。先将马铃薯洗净,挖芽去皮,准确称取200g,然后将马铃薯切成玉米大小的颗粒或薄片。用量杯量取1000~1200ml水于铝锅内煮马铃薯,待水沸后计时20~25min,当
7、马铃薯酥而不烂时,用双层纱布进行过滤于量杯中,洗净铝锅滤渣,将滤液到回锅中继续以文火加热,加入葡萄糖(或蔗糖)和琼脂,待琼脂溶化,不断搅拌,以免糊锅,注意补足水量。2、分装。将熬面的培养基保持文火,趁热分装。用勺将培养基加入漏斗中,左手握2~5支试管,右手持漏斗下面的玻璃管入试管口内,同时放开止水夹,让培养基逐个流入试管内,培养基高度约为试管长度的1/6~1/5,约10~15ml,注意避免将培养基沾于试管口内外。分装后的试管,在培养基凝固前必须立放。3、制棉塞。用叠放式将未脱脂棉做成棉球,塞入试管
8、口,管口内棉塞底部要求光滑,棉塞侧面要求无褶皱,棉塞长度的2/3在管口内,1/3在管口外。棉塞的松紧以手提棉塞轻晃试管不滑出为度。捆把。以10支试管为一捆,用捆扎绳扎紧。贴上标签,准备灭菌。(三)培养基的灭菌1、手提式高压灭菌锅的构造。锅体、提把、压力表、安全阀、排气阀、灭菌锅腔、筛架、锅盖、胶垫圈、紧固螺栓等。2、高压灭菌锅的使用方法。加水→灭菌物入锅→上盖→对称、均匀地扭紧螺栓→加热升温→压力至0.5kg/cm2时,打开排气阀排除锅内冷空气,压力降至0,排气阀有大量热蒸汽冲出时
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