二穗短柄草三个nac基因的克隆与表达分析

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1、分类号学号M201171531学校代码10487密级硕士学位论文二穗短柄草三个NAC基因的克隆与表达分析学位申请人：冯佳璐学科专业：生物化学与分子生物学指导教师：杨广笑教授答辩日期：2014年1月19日万方数据AThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceCloningandExpressionAnalysisofThreeBdNACGenesinBrachypodiumdistac

2、hyonCandidate：FengJialuMajor：BiochemistryandMolecularBiologySupervisor：Prof.YangGuangxiaoHuazhongUniversityofScience&TechnologyWuhan430074,P.R.ChinaJan,2014万方数据独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对

3、本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到，本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在_____年解密后适用本授权书。本论文属于不保密□。（请在以上方框

4、内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日万方数据华中科技大学硕士学位论文摘要干旱、极端温度和高盐等各种非生物逆境严重影响农作物的产量和品质，植物抗逆性的分子机理及抗逆作物新品种培育一直是植物科学领域研究的热点。近年来，已鉴定出大量的与植物抗逆有关的基因。NAC转录因子是近年来研究的比较多的一类植物中特异的转录因子家族，拟南芥和水稻基因组中NAC编码基因的数量均超过100个。NAC参与植物多种生长发育过程以及植物对生物和非生物逆境的反应。研究表明，逆境诱导性NAC在植物抗逆

5、性反应中起重要作用，而有关新型单子叶模式生物二穗短柄草中NAC基因功能的研究报道很少。本研究从二穗短柄草中克隆得到了3个NAC编码蛋白，根据其与拟南芥和水稻同源NAC同源关系，分别命名为BdNAC3、BdNAC4和BdNAC19，并对其结构进行了预测，在此基础上对其自激活功能、亚细胞定位以及在各种逆境下的表达变化进行了分析，取得的主要研究结果如下：（1）利用生物信息学的方法分析了3个NAC编码蛋白的二级、三级结构以及亚细胞定位预测，并进行了多序列比对，构建了二穗短柄草整个NAC家族的基因进化树。（2

6、）运用酵母单杂交的方法验证了3个NAC编码蛋白的自激活功能，发现BdNAC3和BdNAC19两个基因编码蛋白的自激活活性很强，而BdNAC4的自激活活性相对较弱。（3）利用各种不同逆境条件和信号分子处理二穗短柄草幼苗，并运用荧光定量PCR的方法检测了3个NAC基因在不同处理条件下的表达变化。结果表明，NaCl处理可显著上调BdNAC3和BdNAC19的表达，而PEG处理能强烈诱导BdNAC4的表达，这一结果表明，不同的NAC基因对各种逆境胁迫的响应存在差异。（4）BdNAC3-GFP融合蛋白分析结果

7、表明，BdNAC3定位于细胞核中。本论文的研究结果为进一步深入探讨NAC基因在非生物逆境反应中的作用奠定了基础。I万方数据华中科技大学硕士学位论文关键词：二穗短柄草，BdNAC，基因克隆，基因表达，亚细胞定位，非生物逆境II万方数据华中科技大学硕士学位论文AbstractAbioticstressessuchasdrought,extremetemperaturesandsaltadverselyinfluencetheyieldandqualityofcrops.Themolecularmecha

8、nismsunderlyingplanttolerancetothesestressesandbreedingresistantcropvarietieshavebeenahotresearchinplantscience.Inrecentyears,alargenumberofgenesassociatedwithresistanceinplantshavebeenidentified.NACsareaclassofplant-specifictranscripti