干细胞基础教学ppt课件

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1、OneCellOneDreamWhatarestemcells?未分化细胞自我更新（self-renew）多向分化潜能（multipotential）高度增殖两种方式生长形成两个相同的干细胞对称分裂非对称分裂调节分化蛋白不均匀地分配，一个子细胞不可逆的走向分化终端成为功能专一的分化细胞；另一个保持亲代的特征，仍作为干细胞保留下来。ClassificationofStemCells发育阶段发育潜能全能干细胞（totipotentstemcell,TSC）多能干细胞（pluripotentstemcell）单能干细胞（unipotentst

2、emcell）胚胎干细胞（embryonicstemcell，ES细胞）成体干细胞（somaticstemcell）干细胞的生化特性端粒酶活性高蛋白标志分子胚胎干细胞embryonicstemcells（ES细胞）获得途径从早期胚胎获得从原始生殖细胞获得从移植细胞（克隆细胞）获得胚胎干细胞的分离和建系将囊胚内细胞团的细胞通过体外培养产生未分化的细胞克隆，建立胚胎干细胞系1981年Evans和Martin首次成功分离和建立小鼠胚胎干细胞系1998年Thomson等首次成功分离和建立人胚胎干细胞系Derivedfrominnercellma

3、ss(ICM)ofblastocyst.ICMHumanEScolonyonfeederlayerThefirsthumanEScelllinewasestablishedin1998byJamesA.ThomsonScience282:1145,1998胚胎干细胞体外诱导分化外源诱导因子诱导ES细胞分化诱导因子：维甲酸(RA)、骨形成蛋白(BMPs)、成纤维细胞生长因子(FGFs)等转基因诱导ES细胞分化用转基因技术使某种促分化基因在ES细胞中表达、调节其分化与其他细胞共培养诱导ES细胞分化创造细胞分化的微环境表面免疫原性及增殖调控表

4、面免疫原性时相专一性胚胎抗原：SSEA-1,SSEA-3,SSEA-4TRA-1-60,TRA-1-81和APKOct-4（也叫Oct-3或Oct-3/4）自我更新过程中细胞因子的作用ES内的信号传导网络增殖调控胚胎干细胞的应用及其伦理学问题应用前景基础医学方面人类医学方面伦理学问题如何看待胚胎？胚胎干细胞研究是否毁灭生命“治疗性克隆”是否必然滑向“生殖性克隆”造血干细胞hemopoieticstemcells（HSC细胞）造血干细胞来源123骨髓造血干细胞外周造血干细胞脐带血造血干细胞脐带血细胞造血干细胞间充质干细胞采用密度梯度离心法

5、和免疫磁珠法分离SCF、CSF、IL-3,6等可刺激细胞扩增不同诱导分化条件分化为不同细胞造血干细胞胚胎发生重要特征分裂方式造血干细胞的分化造血干细胞的表面标志已比较明确的人造血干细胞的表面标志包括CD34+、CD38-、Lin-、HLA-、DR-、Thy+、c-Kit+、CD45RA-和CD71-等。人类造血干细胞还对5-氟脲嘧啶和4-氢过氧环磷酰胺有抗性。在干细胞不同的分化阶段，有不同的表面标志表达，故不同的表面标志已成为区分造血干细胞分化阶段的重要标志。造血干细胞移植同基因BMT（SBMT）异基因BMT（ALLO-BMT）自身BM

6、T（ABMT）骨髓移植(BMT)外周血干细胞移植（PBSCT）自体PBSCT（AUTO-PBSCT）异基因PBSCT（ALLO-PBSCT）非血缘关系PBSCT（UPBSCT）同卵双胞胎脐血移植脐血移植(CBSCT)CBSCT主要适应于白血病、恶性血液病、某些遗传病等的治疗,是目前国内外较为流行的一种治疗手段。优点:采集方便,来源丰富;易储存;被病毒污染少;GVHD发生率低,可移植性强;组织配型要求低,寻找HLA容易;缺点:须一次植入成功;若早期植入延误,出血和被污染可能性大;来源有限;有潜在的遗传病发生。间充质干细胞mesenchym

7、alstemcells（MSC细胞）间充质干细胞间充质干细胞来源特点形态国际细胞治疗学会的相关定义1、细胞为成纤维细胞样呈漩涡状贴壁生长2、细胞表型中CD105、CD73和CD90的阳性率必须大于95%，而CD45、CD34、CD14、CD19和HLA-DR的阳性率必须小于2%3、具有分化为成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞的能力HUC-MSCs的分离培养酶消化法组织块贴壁法对细胞直接损伤小，原代培养细胞纯度高所需时间长获得细胞数量大，培养时间短细胞纯度略低HUC-MSCs的生物学特性表面标志基因表达多向分化支持功能免疫调节HUC-MSCs的

8、应用研究移植方面的研究免疫调节活性的应用组织工程或基因治疗中应用HUC-MSCs研究中存在的问题1.分离、培养及鉴定问题2.应用中存在的问题干细胞最新研究动态胚胎干细胞可以感知DNA损伤发生“自杀”行为—M