山东无花果种质资源遗传多样性评价与品种鉴定的研究

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1、青岛农业人学硕士学位论文摘要山东省无花果种质资源遗传多样性评价及品种鉴定研究摘要山东省作为我国无花果(FicuscaricaL)早期主要传入地和栽培地区之一，已有一百多年的栽培历史。特别是山东半岛一带，被称为我国无花果的沿海栽培中·S。无花果虽然以无性繁殖为主，但是不同环境条件下的繁衍盈升，也会造成种内变异的多样性。而且，在很多地区都是庭院栽培，一些特殊的基因资源极有可能还未得到认识和利用。所以，很有必要对分布地区的无花果资源进行勘察和搜集保存，展开其多样性研究，尤其是对种质间的遗传差异从分子水平提供更为直接的证据，为进一步有效的开发利用奠定基础。本研究利用RAPD(RandomA

2、mplificationPolymorphismDNA)标记技术，对从山东省境内不同地区搜集到的无花果资源的多样性进行了评估。并对与叶形相关的分子标记进行了研究。另外，利用RAPD和SSR(SimpleSequenceRepeat)两种分子标记技术构建部分无花果品种的DNA指纹图谱。获得如下研究结果：1．通过对8个市近20个乡镇(社区)的考察搜集，共搜集无花果资源66份，现田间保存资源3l份共55株。2．通过15个随机引物在58份资源上的RAPD分析，将所搜集的资源分为23个不同的基因型。随后又从120个随机引物中筛选出28个多态性高的引物，进一步对这23个基因型无花果进行RAPD

3、多样性分析。共检测到309个清晰的位点，扩增片段范围在200bp～2500bp之间。其中多态性位点为236个，共有位点为73个，位点多态性比率为76．4％。利用NTSYS—pc分析软件分析了这23个基因型间的遗传相似系数。计算结果表明，绝大多数基因型之间遗传相似性较高，但其中之一与其它基因型资源的相似系数较低，可见其遗传背景比较特殊。利用UPGMA法构建了聚类树状图，当阈值为O．760时，可将23个基因型聚为五类。3．在对无花果的多样性进行分析的过程中，鉴定出两个与基部非心形／心形叶形相连锁的标记：$2082⋯o、$2104⋯4。这两个标记经SCAR转化后，前者的多态性依然存在，可

4、作为资源鉴定的有效手段。而后者在不同叶形间的多态性消失，对于这一问题，青岛农业火学硕士学位论文摘要我们还会做进一步的研究。4．利用RAPD和SSR两种分子标记技术，对收集到’的11个无花果品种的DNA指纹进行了分析。经过28个随机引物的分析，最终区分出其中的三个品种，并将剩下的8个品种分为三组。其中，引物S1259的区分效率最高。通过8对SSR引物的扩增分析，多态性较高的引物MFCl和MFC4均能鉴定出其中的两个品种。将这两对引物扩增结果结合分析，得到了与RAPD分析相同的鉴定结果。这一研究结果，将为无花果的品种鉴定提供依据。关键词：无花果；分子标记；遗传多样性；叶形标记；品种鉴定

5、AbstractInoHrcountry,Shandongprovinceisnotonlyoneofthemostimportantareasforfigs(FicuscaricaL)distribution，butalsohasalonghistoryforcultivation．Althoughthefigtreesareexchangedbyvegetativepropagation，itispossiblethattheeffectofenvironmentsresultsinintraspeciesvariability．Moreover’inmanyareas，fig

6、sareculturedinyardsindividuallyandmanypeculiargenesarestillunknownandunutilized．ItisnecessarytoinvestigateandcollectthegermplasmresourcesoffiginShandongprovince．Thegeneticdifferencewillbefoundamongcollectionaccessionsbytheanalysisofdiversityinmolecular1evel．Thegeneticdiversityoffiggermplasmres

7、ourcesinShandongprovincewasassessedbyRandomAmplificationPolymorphismDNA(RAPD)technique．Atthesametime，themolecularmarkerslinkedtotheleafshapeoffigwerestudied．Additionally,severalfigvarietieswereidentifiedbyDNAfingerprintsusingRAPDandSimp