佛手坐果及果形发育的初步研究

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1、硕士学位论文万方数据佛手坐果及果形发育的初步研究指导教师姓名、职称鄞里丕塾援≥廛羞萱副塾援单位地址逝江垣堇太堂化堂皇生金科堂堂院申请学位级别亟±专业植物堂论文提交时间2Q!垒生垒月论文答辩时间2Q!垒生5旦学位授予单位和日期浙江!巫堇太堂(2Q!垒生鱼旦)答辩委员会主席论文评阅人——2014年5月万方数据PRELIMINARYSTUDIESONFRUITSETANDFRUIT-SHAPEDDEVELOPⅣ正NT0FFINGEREDCITRONADissertationinbotanyUndertheSupervisionofProfessorGuoWeidong&LiaoFangleiByC

2、henMinguanZhejiangNormalUniversityJinhua，Zhejiang，ChinaMay，2014万方数据本研究得到浙江省科技计划项目资助(2008C22002)ThisresearchwasfundedbyScienceandTechnologyProjectsofZhejiangProvince(2008C22002)万方数据佛手坐果及果形发育的初步研究摘要佛手(CitrusmedicaL．var．sarcodactylisSwingle)，芸香科(Rutaceae)柑桔属(Citrus)植物，是香橼(Citrusmedica)的变种，无籽。佛手奇特的指状果形

3、极具观赏价值而倍受人们青睐。目前国内外对于佛手的研究不多，缺乏对佛手无籽原因和果形建成等基础理论研究。本文以三年生带花(芽)或幼果的金华佛手(青皮)和香橼为试材，研究佛手坐果过程、花芽分化过程，以期揭示佛手的坐果机制及果形形态建成机制。l、对开花前佛手进行去雄套袋处理，与自然生长对照相比，去雄套袋果实生长量(横纵径积)变化不显著(矿0．05)，说明佛手无需传粉或别的刺激就能结实，‘属于天然单性结实。利用实时荧光定量PCR技术对佛手和香橼开花前后果实／AA9基因的表达水平进行比较分析，发现佛手果实基部／AA9基因的表达量在花后3d表现极显著下调，表明佛手内源生长素含量较高可自发坐果，推测柑桔属

4、植物授粉受精作用发生在花后3d左右。佛手果实指部和基部／AA9基因在花后3d表达量不同，差异极显著(胙0．01)，其他时间均无太大差异，推测佛手指部与基部可能分别来源花柱和子房。2、佛手开花当天剥离的花粉在5％蔗糖、0．05％硼酸、0．01％硝酸钙离体条件下培养，萌发率达到最大值30．57％，表明佛手雄蕊育性正常，佛手无籽与雄蕊无关。检验开花当天及花后ld、2d、3d、4di5d、6d佛手幼果的小指(花柱)可授性，发现佛手在开花后几天时间内柱头(指部)酶活正常。以香橼为对照，比较佛手人工授粉当天、ld、2d、3d、4d、5d、6d后花粉在柱头的萌发情况。发现香橼花粉管在花后34d可长至子房，

5、佛手指部(花柱)表面花粉量比香橼柱头少，部分萌发并伸长，随时间增加，花粉管未见长入基部(子房处)，说明佛手无法正常受精。通过对开花当天的佛手和香橼幼果横切的石蜡切片观察发万方数据现，佛手的胚珠退化消失或异常，导致无法受精从而单性结实。3、通过生长素极性运输抑制剂(NPA)处理对佛手果实发育和果形变化的影响，研究佛手果形与生长素(IAA)之间的相关性。结果表明，NPA对改变佛手果实果形具有一定效果，且作用效果和果实成熟度负相关。随着佛手果实的成熟，其IAA合成部位的活性顶端强于底端，这一结果与坐果率分析结果一致。单独施加NPA或IAA均可使佛手果实指部生长不均一，说明IAA在佛手果实果形建成中

6、具有重要作用。4、运用石蜡切片技术，取佛手的花芽到幼果进行连续切片。经番红固绿双染切片后观察发现，佛手花芽从原基分化开始，生长发育形成花序，花序中心顶花一般形成果实。佛手花芽分化过程与大多数植物花芽进程一致，可分为萼片期、花瓣期、雄蕊期和雌蕊期。在雄蕊原基启动发育后，中央雌蕊原基逐渐凸起，顶端分化形成小指，最后形成幼果。在切片的基础上，以免疫荧光抗体标记技术，对佛手果实发育中内源生长素(IAA)分布情况进行定位分析，发现IAA分布较密集区域，对应指部手指边缘位置。可见佛手果实发育过程中，其奇特果形的产生与IAA的分布规律有密不可分的关系。总而言之，佛手果实因雌蕊胚珠退化或异常而无法完成受精，

7、但其自身原有的生长素可促进佛手以单性结实方式坐果，并形成无籽果实。随着佛手果实的继续发育，其果实形状也发生变化，逐渐呈现指状，这可能与果实内源IAA的分布规律具有一定的相关性。关键词：单性结实；／AA9；无籽果实；NPA；果形；花芽分化；荧光免疫II万方数据PI也LIMINARYSTUDIESONFRUITSETANDFI己UIT-SHlAPEDDEⅦLOPMENTOFFINGEREDCITRONABSTRA