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1、维普资讯http://www.cqvip.com138—144草业学报第17卷第5期10/2008ACTAPRATACULTURAESINICAVO1.17。No.5野生鹅观草种质的醇溶蛋白遗传多样性分析肖苏,张新全,马啸,张建波,易杨杰,黄林凯(四JII农业大学草业科学系,四川雅安625014)摘要:采用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(A—PAGE)对采自中国四川I、重庆、甘肃、日本5个地区的42份野生鹅观草材料进行遗传多样性分析,获得下述结果,1)供试材料共分离出29条带纹,多态率达89.66%。材料间的遗传相似系数范围在0.448~0.966,平均GS值为0.695,说明供试野生鹅观草具有较
2、为丰富的遗传多样性。2)对所有材料进行聚类分析,可聚为3类,基本能按照生态地理环境来源聚为一类,表明供试材料的聚类和其生态地理环境间有一定的相关性。3)基于Shannon多样性指数估算了5个鹅观草生态地理类群内和类群间的遗传分化,发现类群内遗传变异占总变异的83.69,类群间遗传变异占总变异的16.31。4)对各生态地理类群基于Nei氏无偏估计的遗传一致度聚类分析表明,各生态地理类群间的遗传分化与其所处的生态地理环境具有一定的相关性。关键词:鹅观草;醇溶蛋白;遗传多样性;聚类分析中图分类号:$543.03;Q943文献标识码:A文章编号:1004—5759(2008)05—0138—07鹅观草
3、(Roegneriakamoji)是小麦族(Triticeae)鹅观草属的一种六倍体多年生禾草,广泛分布于中国、日本和朝鲜。原产于我国,除青海、西藏外,分布基本遍及全国n]。多生长在海拔100~2300m的山坡和湿润草地,它既可以在沙质土上生长,也可以在粘质土上定居,具有多花多粒、耐湿、高抗赤霉病等特性,是有较高经济价值的多年生优质牧草,在麦类作物抗赤霉病育种中也具有重要的应用价值¨2]。醇溶蛋白在小麦品种间及麦类近缘植物种间、种内不同居群间存在明显的差异,其电泳图谱的带纹多少及组合方式完全受基因型控制,几乎不受环境的影响,可以构成品种的指纹。该指纹图谱可广泛应用于品种鉴定、种子纯度检验、代换
4、系、易位系和体细胞无性变异的鉴定。目前对鹅观草醇溶蛋白研究报道的较少,仅见杨烈等”和肖海峻用醇溶蛋白电泳分析来研究鹅观草居群间醇溶蛋白水平上的遗传多样性。本研究利用A—PAGE技术对收集于四川、重庆、甘肃、日本4个地区的42份野生鹅观草种质进行分析,以期了解各份种质及其各地理类群间在醇溶蛋白水平上的遗传多样性,为野生鹅观草的育种开发提供有效的数据信息。1材料与方法1.1供试材料供试材料(表1)为四川农业大学草业科学系和美国国家植物种质资源库提供。供试材料在鹅观草种子成熟时期收集,每一采集点按单株采集,每株所有单穗的种子为1份材料,2006年秋季每份单株材料随机取5个单穗的种子(5~10颗)在植
5、物光照培养箱中发芽,每个单穗幼苗随机取l株待其长至2叶期后移植于盆钵中,单株盆栽。除开花期套袋外,田间管理按常规进行。1.2研究方法每份材料取20粒种子称重粉碎后放入1.5mL离心管中,按照1mg种子加5L的比例加入样品提取液(2一氯乙醇25+甲基绿0.05),在4~C的冰箱里浸提过夜。按照国际种子检验协会(ISTA)于1986年颁布的酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(pH值一3.2)标准程序对供试材料进行醇溶蛋白分析。选取加拿大春小麦品种“Mar—quis”(TriticumaestivumCV.Marquis)为对照。收稿日期:2007—11—19;改回日期:2008—01—02基金项目:南方优良饲
6、草选育与分子聚合育种体系的基础研究,科技部973项目(2007CB108907),四川I省科技厅“十一五”牧草育种攻关项目(O2SGO23—001)和农业部草地农业生态系统学重点开放实验室资助。作者简介:肖苏(1982一),女,四川乐山人,在读硕士。E—mail:xiaosu一1218@126.tom.crl*通讯作者。E-mail.:zhangxq@sicau.edu.crl维普资讯http://www.cqvip.com第17卷第5期草业学报2008年表1供试材料Table1WildR.kamodiaccessionstestedinthisstudy序号材料编号采集地生境海拔序号材料编号
7、采集地生境海拔No,AccessionOriginsiteHabitAltitudeNo.AccessionOriginsiteHabitAltitud’(m)(m)1PI499623日本东京TokyoJapan路边Roadside8O22RSC一168四川广元GuangyuanSichuan河滩Floodland5102RSC一065四JII乐山LeshanSichuan路边Roadside39
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