第1章动物源性细菌

第1章动物源性细菌

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1、第16章动物源性细菌主讲人:中华医学会临床微生物学组(1~4届)全国委员《中华医学检验全书》主编北华大学临床微生物学教授海南医学院客座教授李影林2011年4月一、掌握1.炭疽芽胞杆菌的主要生物学性状和致病性。2.布鲁菌属的主要生物学性状和致病性。3.鼠疫耶尔森菌主要生物学性状和致病性。二、熟悉1.布鲁菌属的免疫性和微生物学检查法。2.炭疽芽胞杆菌的免疫性与微生物学检查法和防治原则。3.鼠疫耶尔森菌的微生物学检查法防治原则。三、了解1.布鲁菌属的防治原则。2.炭疽芽胞杆菌与其他需氧芽胞杆菌的区别。3.放线

2、菌属和诺卡菌属的生物学性状及致病性;放线菌属的微生物学检查和防治原则。目的和要求第一节布鲁菌属形态与染色1.初次分离G-两端钝圆的小球杆菌,偶见两极浓染。多次传代牛布鲁菌和猪布鲁菌可变成杆状。2.无芽胞、无鞭毛,光滑型有微荚膜。3.柯兹洛夫斯基(Козρовскиǔ)染色法布鲁菌染成红色,其他杂菌染成绿色。羊布鲁菌镜下形态(革兰染色)羊布鲁菌镜下形态(革兰染色)培养特点1.需氧菌最适生长温度35~37℃最适pH6.6~7.42.培养较难:需加血清或肝浸液,初次分离需5%~10%CO23.经37℃48h培

3、养形成S型菌落,人工传代可转变为R型菌落.4.在血平板(BAP)上不溶血.羊布鲁菌菌落特征(BAP)菌种触酶氧化酶糖分解精氨酸脱羧硝酸盐还原脲酶H2S产生染料的耐受葡萄糖半乳糖阿拉伯糖硫廑复红(40µg)(20µg)羊布鲁菌+++---+V-++牛布鲁菌+++++-+++-+猪布鲁菌++++++++(-)+-森林鼠布鲁菌+-+++-+++--绵羊布鲁菌+--------+(-)犬布鲁菌+++--+++-+-生化反应布鲁菌的生化特性分解尿素,产硫化氢。根据H2S多少和碱性染料(复红1/5万、硫堇1/2万)

4、培养基中生长情况,羊++、牛+-、猪-+(+生长,-不生长)用以鉴别三种布鲁菌。Ag构造——十分复杂(1)A和M抗原临床上用于诊断的主要有A-Ag和M-Ag两种。羊布鲁菌——以M为主。A:M约为1:20牛布鲁菌——以A为主。A:M约为20:1猪布鲁菌——介于二者之间。A:M约为2:1粗糙型菌株不含A、M抗原。(2)G-Ag(血Ag)、vi-Ag、L、Y、Z-Ag羊布鲁菌A:M=1:20(凝集试验:+抗A-、+抗M+)牛布鲁菌A:M=20:1(凝集试验:+抗A+、+抗M-)猪布鲁菌A:M=2:1(凝集试验

5、:+抗A+、+抗M+)抵抗力1.本菌对外界环境抵抗力较强。在干燥的胎膜中可生存5~160d。羊毛中1.5~4个月。冷藏的乳制品中6~40d。牛粪中生存120d,水中5~150d;土壤中24~40d。2.对热较敏感。煮沸立即死亡。湿热60℃15min即死。3.对直射日光敏感20min即死。4.对一般消毒剂敏感。2%末苏儿,30g/L碳酸,0.05%升汞15min即死。5.对抗生素敏感。致病物质(1)内毒素(2)侵袭力—荚膜(3)侵袭性酶类—如透明质酸酶、过氧化氢酶。侵袭力强,可通过完整的皮肤、黏膜(呼吸道

6、、消化道、眼结膜等多途径)进入人体。(4)迟发型变态反应所致疾病布鲁菌感染家畜引起母畜流产;感染人体,反复引起菌血症,患者热型呈波浪式,临床称为波浪热。人类感染不引起流产,因为人类胎盘不含赤鲜醇。布鲁菌感染后,可获得免疫力,并在菌种和生物型之间有交叉免疫。布鲁菌为细胞内寄生菌,其免疫以细胞免疫为主。免疫性人患病为什么会出现波状热呢?流行特点1.一年四季均可发生,但有较明显的季节性。南方→气温较暖,当年11月~次年1月产的冬自季发病多→人在次年3~4月相继发病。北方→气候寒冷2~4月产的春季发病为主→人多

7、在5~7月发病。2.任何年龄均可发生3.成人发病与职业有关与病兽接触机会多的人4.病兽是主要传染源分布:布病几乎遍布全世界微生物学检查法1.标本的采集:临床标本中最易获得阳性培养的是发热期的血液,其次是骨髓、尿液、脑脊液、关节液、乳汁、流产胎儿的淋巴结、肝、脾、肺组织和流产病兽的子宫分泌物等。2.检验方法①凝集反应(1)标本的直接检查②PCR检测(2)分离培养标本血平板表面光滑湿润、圆形、凸起、灰色、边缘整齐、直径2~3mm的小菌落。不溶血。有时可出现粘液样或干燥的硬皮样菌落。(3)生化反应及染料抑制试

8、验35~37℃5~7d(4)抗体检测①不完全抗体检测(Coomb’S试验)。原理:人感染后2周可出现抗体,其中有不完全抗体(又称为封闭性抗体)。它虽能与相应Ag结合,但不出肉眼可见反应。由于不完全抗体本身是球蛋白,故可用人血清球蛋白来免疫动物,制备抗球蛋白(即抗抗体)。如将此种抗球蛋白加于抗原与不完全抗体的复合物中,此复合物即可与抗球蛋白结合并凝集成大块,出现可见反应即抗球蛋试验阳性。不凝集为阴性。即:抗球蛋白+抗原-不完全抗体复合物电解质

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