光周期、盐度、温度对孤雌卤虫的滞育诱导效应研究

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1、光周期、盐度、温度对孤雌卤虫的滞育诱导效应研究学位论文答辩日期：指导教师签字：答辩委员会成员签字：谨以此论文献给我尊敬的导师，我的家人和朋友们王智超独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得!注；垫逡直墓丝益蔓挂别直塑的!奎拦亘窒2或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名易石

2、留匙一签字日期：≯，婷6月岁日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，并同意以下事项：l、学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。2、学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学“中国学术期刊(光盘版)电子杂志社”用于出版和编入CNKI《中国知识资源总库》，授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。(保密的学位论文在解密后

3、适用本授权书)越帅字为骅巾脚妯轹，月姑f者年作当文弦敝9位期学日：字整光周期、盐度、温度对孤雌卤虫的滞育诱导效应研究摘要卤虫是一类生活在高盐环境中的小型甲壳动物，因其休眠卵具有重要的经济价值，使得卤虫成为一种潜在的人工养殖经济品种。无论是孤雌生殖还是两性生殖类型的卤虫都具有两种繁殖模式：滞育模式(母体产休眠卵)和非滞育模式(母体产无节幼体)。目前尚无成熟的技术能实现卤虫繁殖模式的完全人工可控，繁殖模式的控制实际上涉及的是在昆虫中研究比较集中的滞育诱导这一问题，通过明确环境生态因子对卤虫的滞育诱导效应、确定其滞育

4、诱导敏感期，将有助于发明调控繁殖模式的方法和阐释滞育诱导的机制。为此，本文开展了如下四方面的工作：1．利用孤雌生殖卤虫克隆种群为研究对象，通过实验生态学方法研究了盐度与温度、盐度与光周期、温度与光周期组合对卤虫的滞育诱导效应，在盐度与温度组合中，利用双因子重复数据方差分析显示温度对滞育胎次比例影响极显著(P

5、效应极显著(P<0．01)；在温度与光周期组合中，双因子重复数据方差分析结果显示，温度(P<0．01)、光周期(P<0．01)对滞育胎次比例均有极显著的影响，温度与光周期的交互效应极显著(P<0．O1)。研究结果显示长光照周期和较高温度更有利于非滞育模式的发生，但长光照周期对非滞育模式诱导的效应可以被高盐度抵消，然而温度对繁殖模式的影响不受高盐度的干扰。与温度相比，光周期对繁殖模式的影响作用更大，当温度与光周期对繁殖模式的影响效应相反时，繁殖模式更多的是表现光周期的影响效应。另外，所有各组的研究结果显示，除了个

6、别胎次，繁殖模式与胎次间无明显相关性。2．在确定了光周期、温度和盐度对克隆种群的滞育诱导效应的基础上，通过设置非滞育模式养殖条件和滞育模式养殖条件间的转移养殖试验，研究并确定了卤虫具有滞育诱导敏感期；该滞育诱导敏感期处于后期幼虫III期和后期幼虫Ⅳ期之间，该时期生殖节部位最主要的特征如下：从侧面观，卵囊端己自由悬挂于腹节腹面，并超过生殖节，达到第三腹节的中央；组织学特征显示在滞育诱导敏感期卵巢发育阶段为卵黄发生前卵母细胞期。3．在确定滞育诱导敏感期的基础上，通过克隆hrHsp22基因的编码区部分片段并利用qRT

7、—PCR半定量研究了两种繁殖模式下滞育诱导敏感期前、滞育诱导敏感期和滞育诱导敏感期后三个发育阶段该基因的表达情况，结果表明在滞育模式下，ArHsp22mRNA表达量在滞育诱导敏感期后较滞育诱导敏感期和滞育诱导敏感期前显著升高；在非滞育模式下，三个发育阶段无显著差异；而在滞育诱导敏感期，滞育模式与非滞育模式间ArHsp22mRNA表达量无显著差异，提示该基因可能与滞育诱导并无关联，而仅与成体本身应对极端环境以及保护休眠胚胎有关。4．基于昆虫黑化诱导激素(Corazonin，Crz)及其受体结构上与甲壳动物的促性腺

8、激素释放激素(GnRH)及受体有着最近的亲缘关系，并且Crz激素与昆虫的滞育诱导具有密切的相关性，本文通过免疫组织化学和蛋白免疫印迹的方法研究了GnRH受体类似物在卤虫体内的分布以及在滞育诱导敏感期前、中、后三个阶段的差异性表达。结果表明，GnRH受体类似物主要位于卤虫眼柄的感光系统区，视神经神经节区，视叶髓质区；部分脑区；小颚器的端囊以及部分排泄管区；生殖节的卵壳腺，而在卵母细胞无明