生物技术制药习的题总精选

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1、生物技术制药复习题第一章绪论第一节生物技术的发展史1、生物技术:以生命科学为基础,利用生物体的特性和功能,设计构建具有与其性状的新物种或新品系,并与工程结合,利用这样的新物种进行加工生产,为社会提供商品服务的一个综合性技术体系。它的范畴:基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、生化工程。基因工程是生物技术的核心。P12、蛋白质工程----第二代基因工程;海洋生物技术-----第三代生物技术P13、生物技术发展史:传统、近代(抗生素、发酵罐)、现代(DNA重组)P31974年,Boyer和Cohen建立了DNA重组技术1975年,Ko

2、her和Milstein建立了单克隆抗体技术1982年,第一个基因工程药物重组人胰岛素被批准上市1989年,我国第一个基因工程药物干扰素批准上市2003年,中国的重组腺病毒-p53注射液成为石阶上第一个正式批准的基因治疗药物。第二节生物技术药物1、生物技术制药:生物技术制药:采用现代生物技术人为地创造一些条件,借助某些微生物、植物或动物来生产所需的医药品。P42、生物技术药物:采用DNA重组技术活其他生物技术研制的蛋白质或核酸类药物。它与天然生化药物、微生物药物、海洋药物和生物制品共同归为生物药物。3、现代生物药物分为4类:重组D

3、NA技术制造的基因重组多肽、蛋白质类治疗剂;基因药物;天然药物;合成与部分合成药物。4、生物药物按用途分为:治疗药物;预防药物;诊断药物。5、生物技术药物的特征:(1)分子结构复杂;(2)具有种属特异性;(3)治疗针对性强、疗效高;(4)稳定性差(5)基因稳定性;(6)免疫原性;(7)体内半衰期短;(8)受体效应;(9)多效性和网络性效应;(10)检验的特殊性。第三节生物技术制药1、生物技术制药的特征:高技术、高投入、长周期、高风险、高收益。P52、生物技术在制药中的应用有哪些?P7(1)基因工程制药:①开发基因工程药物,如干扰素

4、(IFN)、红细胞生成素(EPO)等②基因工程疫苗,如乙肝基因工程疫苗③基因工程抗体,它可以作为导向药物的载体④基因诊断与基因治疗⑤应用基因工程技术建立新药的筛选模型⑥应用极影工程激活素改良菌种,产生新的微生物药物⑦改进药物生产工艺⑧利用转基因动、植物生产蛋白质类药物。(2)细胞工程制药①单克隆抗体技术②动物细胞培养③植物细胞培养生产次级代谢产物。(3)酶工程制药:酶与细胞的固定化及酶转化制药(4)发酵工程制药:发酵工艺改进、新药研制、菌种改造。第二章基因工程制药第一节概述(略)第二节基因工程药物的生产过程P151、基因工程技术:

5、将重组对象的目的基因插入载体,拼接后转入新的宿主细胞,构建成工程菌(或细胞),实现遗传物质的重新组合,并使目的基因在工程菌内进行复制和表达的技术。2、基因工程药物制造的主要程序(过程)(重点和后面几节联系起来)(1)目的基因的克隆(分离目的基因):通过逆转录、反转录-聚合酶链式反应、化学合成方法来制备cDNA,再通过核酸探针杂交或免疫反应来筛选目的基因(2)目的基因与载体连接构建DNA重组体:通过限制性内切酶DNA连接酶等核酸酶,把目的基因组入载体的相关克隆位点,常用的载体有质粒载体和噬菌体载体(3)将DNA重组体转入宿主菌构建工

6、程菌:常用的宿主菌有大肠杆菌、酵母菌等,先使宿主菌处于感受态,再通过转化、转导等方式把重组DNA导入宿主菌,以构建工程菌(4)工程菌发酵:提供适当的培养基、反应器、控制好发酵过程中的各种参数,如温度、PH、溶氧等,并通过升温来诱导产物表达(5)目的基因表达产物的分离纯化:通过固液分离、初步纯化、高度纯化、成品加工来制备产品;若是胞内产物需要细胞破碎,若是包涵体则需要变性和复性(6)产品的检验:检测产品的质量和性能。第三节目的基因的获得1、利用基因工程生产蛋白质或多肽需要得到其基因,制备目的基因常用的方法有哪些?P16(1)逆转录法

7、以mRNA为模板,经逆转录的到cDNA,构建cDNA文库,从cDNA文库中筛选目的基因。由于RNA转录加工过程中,内含子序列已被剪切掉,因此,cDNA文库中无内含子,适于在原核系统中表达。但是,cDNA只包含蛋白质的结构基因部分,缺少有关的调控序列,因此在原核系统中表达,还需要根据表达载体的结构,配以相应的调控序列。(2)利用反转录-聚合酶链式反应制备基因(3)化学合成法:只适用于克隆小分子肽的基因2、利用逆转录法获得目的基因的基本过程P16(1)mRNA的纯化:从表达目的基因的细胞中提取总RNA,用寡聚脱氧胸苷(dT)纤维素柱从

8、总RNA中提取纯化mRNA。(2)cDNA的合成:以mRNA为模板,利用逆转录酶合成cDNA第一链,再用DNA聚合酶合成cDNA的双链。(3)cDNA克隆:利用合适的连接方法,将产生的双链cDNA片段插入到合适的载体中。(4)构建cDNA文库:将c

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