珠子参热转化(加工炮制)机制研究

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1、陕西中医学院硕士学位论文珠子参热转化（加工炮制）机制研究姓名：李渊源申请学位级别：硕士专业：中药学指导教师：宋小妹201204中文摘要本论文以珠子参皂苷成分为研究对象，对其进行以下几个方面研究。首先，在前期实验研究的基础上，发现加热对珠子参皂苷成分有影响，为此，采用化学水解、色谱技术对珠子参的主要活性部位一总皂苷进行化学成分分离，除人参皂苷Ro、竹节参皂苷iVa外，从中又得到姜状三七苷Rl、去葡萄糖竹节参皂苷iVa两个主要皂苷成分，并按化学对照品的技术要求对其进行制备研究。在此基础上，为全面、准确分析珠子参熟转化(加工炮制)过程中成分变

2、化规律建立了HPLC同时测定4种成分分析方法。结果发现人参皂苷Ro、竹节参皂苷1Va的含量随时间的增加逐渐降低，而姜状三七苷Rl、去葡萄糖竹节参皂苷1Va的含量随时间的增加逐渐升高。提示，热处理会引起珠子参化学成分的转化，推测在珠子参总皂苷的制各过程中经过提取．浓缩热处理会使姜状三七苷Rl和去葡萄糖竹节参皂苷1Va的含量升高。第三，皂苷化学转化机制研究：实验结果发现在酸水解条件下，珠子参总皂苷水解产物以姜状三七苷Rl和去葡萄糖竹节参皂苷IVa为主要化学成分。同时，还通过对照品酸水解实验推测，姜状三七苷R1和去葡萄糖竹节参皂苷IVa可能是

3、人参皂苷Rp和竹节参皂苷IVa在酸水解的条件下去掉28位葡萄糖的产物。最后，抗肿瘤作用和机制研究：采用体外实验MTT法，检测不同浓度珠子参总皂苷及去葡萄糖竹节参皂苷IVa对人源HepG2肝癌细胞、人源HT-29结肠癌细胞和人源ECV-304血管内皮细胞体外增殖的抑制情况。其次，还采用流式细胞术和Western-blot技术探索珠子参皂苷对HepG2细胞凋亡和周期，以及蛋白质表达的影响。结果发现，珠子参总皂苷及去葡萄糖竹节参皂苷IVa对上述3种细胞均有显著抑制作用，提示去葡萄糖竹节参皂苷IVa可能是珠子参总皂苷中发挥抗肿瘤作用的主要化学成

4、分。然而，珠子参经过合理、科学的热处理(炮制)可以提高抗肿瘤活性成分(去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa)含量，从而增强了珠子参及珠子参总皂苷的抗肿瘤活性。关键词：珠子参；热转化；炮制机制；抗肿瘤作用；StudiesonthermaItransformationofprocessingmechanismofRhiZomaPanacisMajorisAbstractThispaperaimedtostudyontotalsaponinsofRhizomaPanaeisMajoris[PanaxjaponicusC．A．Mey．Var．Major(Bu

5、rk)C．Y=WuetK．M．Feng】insuchaspectsbelow．Firstly,basingonthestudiespreviously,wehavefoundthat}le撕ngprocessmayhaveeffectsonthesaponinsofRhizomaPanacisMajoris．Therefore，methodsofchemicalhydrolysisandchromato孕apKctechniquewereusedtoseparatethetotalsponinsofRhizomaPanacisMajor

6、is嬲mainactivesite．We’vegetfourmainsponins．TheywereGinsenosideRo，ChikusetsusaponinIVa，zingibrosideRaanddeglucose—chikusetsusapomnWa,meanwhile，lasttwocompoundswereobtainedfirstlyandwerestudiedaschemicalreferencesubstanceaccordingtorelevanttechnicalrequirementsfurtherly．And

7、onthatbasis，inordertoanalysisthevariationofchemicalconstituentsinthermalconversionprocessofRhizomaPanacisMajorisoverallandaccurately,wehaveestablishedtheexperimentalmethodtodeterminethefoursaponinsbyHPLCandstudiedonthedifferentproceedproductsofRhizomaPanacisMajoris．There

8、sultsshowedthatthecontentsofGinsenosideRoandChikusetsusaponinIVaweregraduallydecreasedasthetimeincrease