内皮祖细胞移植对肾脏急性缺血再灌注损伤的影响及其机制研究

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1、东南大学硕士学位论文内皮祖细胞移植对肾脏急性缺血再灌注损伤的影响及其机制研究姓名：陈波申请学位级别：硕士专业：临床医学指导教师：贾瑞鹏2012-05-28中文摘要内皮祖细胞移植对肾脏急性缺血再灌注损伤的影响及其机制研究研究生：陈波1导师：贾瑞鹏教授21．东南大学临床医学院2．南京医科大学附属南京医院泌尿外科摘要目的：进行EPC移植，观察内皮祖细胞(EPCs)对急性缺血再灌注损伤(IRI)大鼠肾组织形态和功能的影响，探讨EPCs对肾脏急性IRI的影响及其可能机制。方法：采用Ficoll密度梯度离心法分离获取骨髓单个核细胞，体外定向诱导、扩增培

2、养内皮祖细胞(EPCs)，并用氯甲基苯甲酰氨(CM．Dil)荧光染料标记；将45只雄性SD大鼠随机分为三组，且I]EPCs移植组(EPCs组，n=15)，对照组(IRI组，n=15)，假手术组(Sham组，n=15)。EPCs组夹闭双侧肾蒂45min，再灌注后经股静脉移植用CM．Dil标记的EPCs；IRI组夹闭双侧肾蒂45min，再灌注后经股静脉注入等量生理盐水；Sham组假手术后经股静脉注入等量生理盐水。观察：(1)EPCs移植对肾脏IRI后不同时间点血肌酐、尿素氮、肾组织形态学和细胞凋亡的影响；(2)移植的EPCs对损伤肾小管周毛细血

3、管的修复作用；(3)CM．Dil标记的EPCs在肾组织中的分布特征。结果：经CM—Dil荧光染料标记的EPCs阳性率接近100％，IRI组、EPCs组大鼠血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)均显著高于Sham组，但EPCs组血BUN、Scr水平却较同一时『白J的IRI组低(P

4、最为显著。结论：EPCs移植可显著减轻IRI肾脏的病理性损伤，抑制细胞凋亡，促进毛细血管内皮修复，促进VEGF等细胞因子分泌，改善肾脏急性IRI后的肾功能，对损伤肾脏产生保护作用。关键词内皮祖细胞；缺血再灌注损伤；细胞移植AbstractTheeffectofendothelialprogenitorcellstransplantationonacuteischemiareperfusioninjuryratsanditsmechanismPostgraduate：CHENBoTutor：Prof．JIARui—pen921．Southea

5、stUniversitySchoolofClinicalMedicine2．DepartmentofUrology,NanjingHospitalAffiliatedtoNanjingMedicalUniversityobjective：Toinvestigatetheeffectsofbonemarrow·derivedendothelialprogenitorcells(EPCs)transplantationontherenalischemiareperfusioninju叫(IRI)rats，andobservethehomingo

6、fEPCsinIRIrenaltissue．Methods：Bonemarrow-derivedmonocytescellswereisolatedfromthefemursandtibiaeofmaleSDratswithficolldensitygradientcentrifugation，induceddifferentiationintoEPCsinvitro，andlabeledwithchloromethyl—benzamidodialky-lcarbocyanine(CM—Dil)fluorescentdyebeforetra

7、nsplantation．Forty-fivemaleSDratswererandomlydividedinto3groups：EPCstransplantationgroup(EPCsgroup，n=15)，controlgroup(IRIgroup，n=15)andsham-operatedgroup(Shamgroup，n=5)．EPCsgroupwereinducedacuterenalIRIbyclampingbilateralrenalarteriesfor45minutes，thentransplantedEPCslabele

8、dwithCM—Dilimmediatelyaftertheresumptionofcirculationinkidney．IRIgroupwereinducedacuteren