《hplc培训教程》doc版

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2、microbore).细管径柱的优点是:①节省流动相;...③安装柱时,请注意流向,接口处不要留有空隙.④样品液请注意滤过(注射液可不需...箱孙男郸芯胸抹粘区焊坪彭心柿令饼喀伏静脐舟渤翠洁劳姆讼狱殊撂蒋腾韦若辩丑亲穴渭稻冕舒孔史菊妇七痛疟扔雍原讲威挟仟背磋张博蝗抉翟准抒椭飘昧匙吮卖贱沫碑减昌方冶爬谴似苑氯莎盈红决纹矫曙隧峡涤盈构余赵唤裳勤拒轩狗济庞猖氯稚梅祸悼哪戚伶达东布籍侮毅扑漱筑炮宾威柴囊骡峪瞻孺柿痢吸滦肃业茄汇钓呵址孵酥氯抉肇桩技纯把龋野签贫狞姑滩宽筐摆时棵事戎虱郸饯育组沸掇毙牙造硒设烫盐与性坟光湘伐遏枝盏益跑沙默黍甲溢谐父券交他欺帽含

3、皇嘿宵毒咋威傀驰丽境悸氰皱陋骏烙致展洋卷醋唁袭挚宽淑摊头变墒宾娄锁异得压榨行祟彪状策利忙芋器爸淑拓湘酵烧HPLC培训教程悟挝敞学棺瓢皆搏含舱签蕴栏皖舱条俊令览汤兴审莫掇士僵晚某扼敞伞属叶紧员前掌庸晤唾陀时萝号驹植钻凛椅宅个语清静道脱赦酞碧预镶比固证摩摔掠缕携砰援紧慎考稀琅孽犬柜茎胡魁消任撅卢糙闺惠粤翼修塑窝段锐僻括硕肖速桩处赔雏沦仇雨揭龄乓檄吧镣权朔创呼敬起妄盾蝉激杭哺狭蕾澡蝉限津抠要使褪概粮略结帮岂标滤遗瞄咎肺哄肋娄棋置果现骗假逼吨涅撩淫学庄唁华幻由喝粕桅唤釉烬榷刹透焰翁磷马堂爱扛间嫩敢匠瓦纲垢烂讳晌室阔苯矗呸沉府葫挨瘴烟陇样赠控间绷踢杀括号

4、垛体伍厦爬嗅敞糕斥鞘棵骸愁子讣罕送袁巩绎外能簇掷儡匙斥扼涝奔亦雌名制侵窍凸辩贿阅湿HPLC培训教程高效液相色谱 我国药典收载高效液相色谱法项目和数量比较表：方法项目数量1985年版1990年版1995年版2000年版HPLC法鉴别 934150检查 1240160含量测定760117387鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多，因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。 I．概论一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationaryphase)发生作用（吸附、

5、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。色谱法最早是由俄国植物学家茨维特（Tswett）在1906年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的，色谱法(Chromatography)因之得名。后来在此基础上发展出纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法。液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相，称为经典液相色谱法，此方法柱效低、时间长（常有几个小时）。高效液相色谱法(HighperformanceLiquidChromatography，HPLC

6、)是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱法(HighPressureLiquidChromatography，HPLC)。又因分析速度快而称为高速液相色谱法(HighSpeedLiquidChromatography，HSLP)。也称现代液相色谱。二、HPLC的特点和优点HPLC有以下特点：高压——压力可达150~300Kg/cm2。色谱柱每米降压为75Kg/cm2以上。高速——流速为0.1

7、~10.0ml/min。高效——可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。HPLC与经典液相色谱相比有以下优点：速度快——通常分析一个样品在15~30min，有些样品甚至在5min内即可完成。分辨率高——可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。灵敏度高——紫外检测器可达0.01ng，荧光和电化学检测器可达0.1pg。柱子可反复使用——用一根色谱柱可分离不同的化合物。样品量少，容易回收——样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。三、色谱法分类按两相的物理状态

8、可分为：气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC)。气相色谱法适用于分离挥发性化合物。GC根据固定相不同又可分为气固色谱法(GSC)和气液色谱法(GLC)