论文:牛主要组织相容性复合体(mhc)酶联免疫分析

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时间:2019-02-21

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4、啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊啊牛主要组织相容性复合体(MHC)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号:CSB-E11212b检测范围:0.78ng/ml-50ng/ml最低检测限:0.195ng/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的牛MHC,且与其他相关蛋白无交叉反应。有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定牛血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中MHC含量。说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。3.中、英文说明书可能会有不一致之处

5、,请以英文说明书为准。4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。概述主要组织相容性复合体(majorhistocompatibilitycomplex,MHC),又称主组织相容性复合基因,是存在于大部分脊椎动物基因组中的一个基因家族,与免疫系统密切相关。共分成两类:第一型:MHCclassI(MHCI)位于一般细胞表面上,可以提供一般细胞内的一些状况,比如该细胞遭受病毒感染,则相病毒外膜碎片的氨基酸链透过MHC提示在细胞外侧,可以供杀手T细胞等辨识,以进行扑杀。第二型:MHCclassII(MHCII)只位于抗原提示细胞上,如

6、巨噬细胞等。这类提供则是细胞外部的情况,像是组织中有细菌侵入,则巨噬细胞进行吞食后,把细菌碎片利用MHC提示给辅助T细胞,启动免疫反应。实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗MHC抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗MHC抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的MHC呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assayplate):一块(96孔)。2.标准品(Standard):

7、2瓶(冻干品)。3.样品稀释液(SampleDiluent):1×20ml/瓶。4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibodyDiluent):1×10ml/瓶。5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidinDiluent):1×10ml/瓶。6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)8.底物溶液(TMBSubstrate):1×10ml/瓶。1.浓洗涤液(WashBuffer

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