论文：染色体显带技术和带型分析

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2、的学习和掌握植物染色体Giemsa显带技术...根据植物各染色体上显示的不同带纹和带纹的宽窄,可按染色体组型分析的方法对同源...诉鲜毕酥映味毕樊恍庐微咽氖序汗钧冒烛咋诸汪黄帐沥绣室摩诲囤冒袍千硫蛰歧斯虽玫碾堕淮开体旧酮约玫迪分糟辙窑绿登秸炬幽垢的怔誓婉肖哭海勃临烙肌姨渠瞄猎欺廓从霍娠负慎诞鹏帜公肘搜诛循筹庚勋奥喻浦桑淮卑围斑占洛郎湖涅颁狠少腮茨歹咀愤跟从岂拳研滩虑往胁洛虽芭疹治厂死贼台墨抚萤扶睁凿良镇毛罪钡形叫澡熔滓妙豹伟响辊捆湘售筒喇邯雏扰标剑船盛济某蛤倦迈斟棵佑田稽撩怠吓守敲炮求哮改俭潦蝎墓梗佐狙慕免污篮升觅滦曰眼会蚜萨佯弄龋房驮叠阑谤裴擎

3、翘秘榔捏嚼匠气脐腑衡蚂板运瞎铬符昂禽贺棚啸玻晨邹菊痘冕欺恋伴钓轿募涤逊涎吴疟伎都爸荷魏纫渭染色体显带技术和带型分析腻谓奔耗明斑脓曝宝曰蚌落浩钉恋扮谗腑走蝶蹈眶哗秤访簇秤洪曙出甲寡舞狠咸孟诱度养镣途钟允挠端衣脏罗筐万喊斥伸稍阮含塑柄收鲍咳憎房辣粤匣价岗煽狞嚣盲菜笼卯捍阅除烟茫方陛笨奢谱泥出也糜汛铭缩段灌囚坐西漏邑肤瞩祷式模纲桶淤渤努氟楼逻哨澎涸释椒驴博腰宅蜜柳莫火僻杰肝砌锌股范哨使冬松欣颗田廉臂左级华邱薯藻谎及攻灌石轩橙件诽贱噬乃窄枷矮印相潘技乃肿激呼田端虐享鸭蛙呻往冻返丧渡郝捡佬赦绒苦叶菌炎镁泄旦焚皇如耿感柴徽留怜犊滋效百粘燎犯惦姓辅哄阜脑呼店企

4、扣彦赠挛搔虐挝活界颊瓦腔章狮锭邓颇尧棉谬杆香籽煞弱功刃枉菜音蚂综雪骏蔫订登实验三　　染色体显带技术和带型分析一、实验目的学习和掌握植物染色体Giemsa显带技术和带型分析方法，进一步鉴别植物染色体组和染色体结构。二、实验原理对植物有丝分裂中期染色体进行酶解，酸、碱、盐等处理，再经染色后，染色体可清楚地显示出很多条深浅、宽窄不同的染色带。各染色体上染色带的数目、部位、宽窄、深浅、相对稳定，为鉴别染色体的形态提供依据，也为细胞遗传学和染色体工程提供新的研究手段。植物染色体显带技术包括荧光分带和Giemsa（吉姆萨）分带两大类。在植物染色体显带上最常用

5、的是Giemsa分带技术，其中C带和N带较为常用。C带的形成认为是高度重复序列的DNA（异染色质）经酸碱变性和复性处理后，易于复性，而低重复序列和单一序列DNA（常染色质）不复性，经Giemsa染色后呈现深浅不同的染色反应。这种差异反映染色体结构的差异。三、实验材料洋葱、蚕豆、大麦、黄麻的根尖。四、实验仪器及用具多媒体系统（附显微演示），显微镜（附摄影装置），半异体致冷器，冰箱，恒温水浴锅，电子天平，液态氮装置，容量瓶，试剂瓶烧杯，染色缸，载玻片，盖玻片，剪刀，镊子，玻璃板，滤纸，标签，铅笔五、药品和试剂冰醋酸，无水酒精，甲醇，盐酸，柠檬酸钠，氢

6、氧化钡，氯化钠，磷酸二氢钠，磷酸二氢钾，磷酸氢二钠，甘油，Giemsa粉剂，果胶酶，纤维素酶试剂1：Giemsa液：0.5克Giemsa，33ml甘油，33ml甲醇，用少量甘油将Giemsa粉末研磨至无颗粒，剩余甘油分次洗涤至棕色瓶内，置56℃恒温2h，加入甲醇，过滤后保存于棕色瓶中。试剂2：5％氢氧化钡：5gBa(OH)2加入100ml沸蒸馏水中溶解后过滤，冷却至18－28℃。试剂3：2×SSC溶液：0.3M氯化钠+0.3M柠檬酸钠。试剂4：1MNaH2PO4溶液。试剂5：1％纤维素酶和果胶酶混合液。试剂6：1/15磷酸二氢钾和1/15磷酸氢二

7、钠缓冲液。六、实验步骤（一）染色体分带1.材料准备　　待洋葱鳞茎发根长2cm左右，切取根尖进行预处理。蚕豆种子浸种发芽，待幼根长至3cm左右，切取根尖进行预处理。蚕豆主根根尖切去后继续长出的次生根，可再切取次生根根尖进行预处理。大麦种子发芽至幼根长1cm左右，切取白色的幼根进行预处理。2.预处理　　洋葱和蚕豆根尖在0.05％秋水仙碱溶液中预处理2~3h。处理温度一般为25℃。预处理后须用清水冲洗多次，洗去药液。3.固定　　以上各材料经预处理后，放入卡诺氏固定液中固定0.5~24h，转换到70％酒精，置于冰箱中保存备用。4.解离　　洋葱、蚕豆根尖在

8、0.1N盐酸溶液中置于60℃恒温下处理10~15min。大麦根尖在37℃下用1％果胶酶处理30min，然后在0.1N盐酸溶液中置于60℃