中国横断山地区绵腹衣属地衣分类及分子鉴别研究

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1、云南中医学院硕士学位论文中国横断山地区绵腹衣属地衣分类及分子鉴别研究姓名：梁萌萌申请学位级别：硕士专业：中药学指导教师：钱子刚；王立松201205中国横断山地区绵腹衣属地衣分类及分子鉴别研究梁萌萌(中药学专业)’指导教师：钱子刚教授王立松副研究员摘要地衣是由共生茵(Mycobiont)和共生藻(Photobiont)互惠共生形成的一类生物有机体。绵腹衣属(AnziaStizenb．)隶属于梅衣科(Parrneliaceae)，子囊地衣(Aseomycota)，地衣型真菌(LichenizedFungi)；具有地衣体叶状，下表面无皮层，而为绵腹组织层；子囊盘位于地衣体上表面；单个

2、子囊内孢子众多；孢子无色，单胞，月牙型的特征；主要分布在亚热带、寒温带，大部分附生于树皮上。全世界己知有37个种；其中，亚洲19个种；中国已报道5个种，有3个种为民间药用地衣，目前尚无对中国横断山地区绵腹衣属地衣的分类研究。本研究采用地衣经典分类、DNA条形码研究方法，明确横断山地区绵腹衣属地衣物种状况，提供资源及地理分布的本底数据，并筛选出适合作为绵腹衣属地衣鉴别的nrDNA内转录区(ITS)基因片段。另外，对中国横断山地区同属于梅衣科的小孢发属进行分子系统研究，为今后树发群地衣的分子相关研究提供借鉴。1．中国横断山地区绵腹衣属Anzia的经典分类研究对中科院昆明植物研究所标

3、本馆的475份绵腹衣属地衣标本分类研究，明确横断山地区绵腹衣属有12个种，分别为A．co勿omVain．，A．formosanaYAsahina，A．hypoIeucoidesMtill．Arg．，A．japonica(Tuck．)Miill．Arg．，A．1eucobatoides(Nyl．)Zahlbr．，A．1eucobatoides￡hypome肠enaA．Zahlbruckner，A．opuntiellaMfill．Arg．A．ornate(Z赳br．)Asahina，A．ornatoidesYoshimura，A．rhabdorhizaLiS．Wang&M．M．Li

4、angsp．nov．，A．sp．I和么．Sp．II；其中，A．rhabdorhiza，A．sp．I和么．Sp．II为3个新种；认为原记载的A．physoideaA．L．Smith．的所有标本，实际应为新种A．rhabdorhiza；中国横断山地区物种数占全世界绵腹衣属地衣32．43％，占全亚洲63．16％。中国横断山地区不仅种类较多，在滇西北的丽江地区，储存量较大，推断中国横断山地区为亚洲地区绵腹衣属地衣的一个分布中心。中国横断山地区绵腹衣属地衣分类及分子鉴别研究2．中国横断山地区绵腹衣属的DNA条形码研究采用地衣核心条形码标记片段nrDNA内转录间隔区(ITS)ITSlF．2

5、KL和ITSlLM-4两对基因片段，以及一个补充条形码叶绿体基因psbF．R片段，对中国横断山地区绵腹衣属地衣137份分子材料进行研究，并从PCR扩增及测序成功率，序列变异位点统计，序列遗传距离差异统计，条形码的“BarcodingGap"检验，利用Kimura-2-parameter模型构建的条码邻接树等方面，评估所选基因片段，认为核核糖体DNA内转录间隔区ITS片段可以作为绵腹衣属地衣进行分子鉴别的候选DNA条形码；而对于鉴别绵腹衣属的叶绿体基因有效条码，还有待于进一步筛选。分子鉴别从一定程度支持经典分类学研究结果，认为A．cD功D幻，A．fomos口．a，A．hypole

6、ucoides，A．1eucobatoides，A．rhabdorhiza，A．spI和A．spII7个种的分类处理可行。3．中国横断山地区小孢发属ITS片段的分子研究分析ITSlF-4基因片段扩增的小孢发属50份样品序列，使用贝叶斯推论(Bayesianinference，BI)进行系统发育树的构建，并选取树发群地衣中的A彪cmriaochroleuca，Sulcariasulcata和Svariens作为外类群进行对照，构建分子系统树，支持横断山地区小孢发属Bryoria为一单系。此研究为今后树发群地衣分子系统构建提供参考。关键词：绵腹衣属；绵腹组织；DNA条形码；序列；分

7、类；横断山2TaxonomicstudyandmolecularidentiffcationresearchofthegenusAnzia(LichenizedAscomycota，Parmeliaceae)from。HengduanMountainsinChinaMeng-mengLiang(MajorintraditionalChinesemedicine)DirectedbyProf．Zi-gangQianandProf．Li-songWangAbstractLichensarebyd