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1、ICS65.020.20B61备案号:41062-2014DB32江苏省地方标准DB32/T2403—2013火焰南天竹组织培养繁殖技术规程TheTechnicalRegulationofTissueCulturePlantletProductionforNandinadomestica‘Firepower2013–12–30发布014–01–30实施江苏省质量技术监督局发布DB32/T2403—2013前言为了规范火焰南天竹组培苗的生产技术,促进火焰南天竹组培苗的生产持续健康发展特制定本标准。本标准编写格式按GB/T1.1-2009《标准化工作导则:标准的结构和编
2、写》的规定编写。本标准由江苏农林职业技术学院提出。本标准由江苏农林职业技术学院起草。本标准主要起草人:史清云、朱艳、史云光、鲍荣静、张荣良、蔡宏宇。IDB32/T2403—2013火焰南天竹组织培养繁殖技术规程1范围本标准规定了火焰南天竹组织培养繁育技术规程的培养基配制、培养材料及消毒、初代培养、组培苗增殖与继代培养、组培苗生根、组培苗炼苗移栽、移栽苗管理。本技术规程适用于火焰南天竹组培苗生产。2培养基配制2.1培养基选择根据火焰南天竹生长发育特性选择MS基本培养基和激素配比。2.2母液的配制和保存2.2.1母液的配制母液配制成几种化合物的混合母液。大量元素母液配制
3、50倍,微量元素母液配制100倍,植物生长物质配制浓度0.5mg/ml~1.0mg/ml。2.2.2母液的保存母液配制好后存放于4℃的冰箱中。2.3消毒灭菌采用高压蒸汽灭菌器进行灭菌。已灭菌的培养基瓶不得与未灭菌的培养基瓶混放,合格的灭菌培养瓶应注明灭菌日期,合格标志。3培养材料及消毒3.1培养材料的选择选取生长健壮、无病虫害、能保证原品种优良性状的火焰南天竹的茎尖部位作为培植材料。3.2外植体的消毒70%酒精浸泡数秒钟,无菌水冲洗2次~3次,再用0.5%~2%的次氯酸钠浸泡10min~15min,用无菌水冲洗3次后接种。4初代培养4.1初代(诱导)培养基MS+TD
4、Z0.1mg+BA1.0mg+IBA0.02mg。4.2外植体的接种培养材料经过消毒后,在无菌滤纸上切割成所需大小,然后进行接种。1DB32/T2403—20135组培苗增殖与继代培养5.1增殖培养每升基本培养基+ZT0.5mg+BA1.0mg+IBA0.05mg+Charcoal1000mg。5.2继代培养每升基本培养基+ZT0.2mg+BA0.5mg+IBA0.1mg+Charcoal1000mg;继代培养周期一般30d继代1次。6组培苗生根6.1生根材料的选择在继代培养的组培苗中剪取或切取生长健壮、叶色正常、叶片舒展、适于生根的无根苗,接种在生根培养基上进行生
5、根培养。6.2诱导生根生根处理产生根原基培养:每升基本培养基+NAA0.2mg+IBA0.4mg+Charcoal2000mg。7组培苗炼苗移栽7.1组培苗炼苗组培苗在移栽前将培养瓶放置温室自然散射光下,温度控制在25℃±3℃,闭口炼苗7d左右,去掉瓶盖再炼苗3d~5d,然后再移栽。7.2组培苗移栽用镊子将生根苗从培养瓶中取出,洗去基部培养基,在800倍多菌灵溶液中浸泡30min后移栽到基质中。基质采用蛭石、草炭、珍珠岩或混合基质等。控制温度25℃±2℃,相对湿度前期80%~90%,以后逐渐降低湿度。当试管苗根系发达,形成侧须根以后,可以移栽到营养钵中,成为容器苗。
6、8移栽苗管理8.1肥、水管理组培苗移栽7d后开始喷施专用营养液,也可以喷施NPK比例为1∶1∶2的复合肥营养液,浓度一般不高于0.5‰,施肥浓度可随着苗龄的增加适当加大;基质不宜太湿,以攥在手中指间不滴水为原则,喷水与施肥相结合。8.2病虫害防治温室使用前彻底消毒,用硫磺、百菌清烟雾剂熏蒸3次~4次,温室使用后经常用福尔马林、来苏水消毒。加强通风,每隔7d喷一次广普性杀菌剂。一旦发现虫害、病害及时用药。_________________________________2
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