一种sd大鼠皮肤光老化动物模型的建立

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1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterConstructionofskinPhotoagingModelonSprague-·DawleyRatByYangliSupervisor：Prof．LiDongqinDermatologyandVenereologySubjectThefirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversityMay2012学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本

2、人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：日期：2012年5月12日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或

3、部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：日期：2012年5月12日中文摘要一种SD大鼠皮肤光老化动物模型的建立硕士研究生杨莉导师李冬芹郑州大学第一附属医院皮肤性病科河南郑州450052人类皮肤的老化是一个非常复杂而漫长的过程，主要受遗传因素及环境因素的影响。遗传因素引起的皮肤老化称为自然老化；在环境因素中，又以紫外线的影

4、响最大，所以由环境因素引起的皮肤老化又称为光老化。皮肤光老化有特定的发生原因和影响因素，与自然老化相比皮肤光老化具有特征性的临床表现：皮肤变薄、失去弹性、正常的皮纹加深，而光老化则表现为皮肤粗糙、深乱皱纹、色素沉着或脱失、癌前病变，癌变，并伴有相应的组织学及分子生物学水平的改变。造成光老化的紫外线主要由长波(UVA320．400nm)和中波(UVB290．320nm)组成，其中UVB是造成皮肤损伤的主要原因。目前临床皮肤光老化疾病的发病机制尚不明确，因此建立光老化动物模型对研究光老化机制和治疗光老化疾病有着

5、重要的意义。因此，如何建立一种模拟性强、操作简便和评价指标明确的光老化动物模型一直是研究热点，但目前国内外皮肤光老化实验研究动物模型的造模方法，以及检验模型的成功与否仍没有统一标准。目的针对建立一种实用的皮肤光老化动物模型的关键步骤与方法进行探讨，并针对光老化动物模型建立过程中的几个关键问题进行探讨，以期为皮肤光老化的研究提供试验基础。中文摘要材料和方法选择健康雄性SD大鼠20只，随机分2组，空白对照组10只、光老化模型组10只。用标记笔标出预照射范围，去除该范围内毛发，造模组用紫外线光疗仪进行照射，每天一

6、次，每次15分钟，共8周时间。造模完成后分别切取两组大鼠背部皮肤，每份标本分为两份，一份立即投入液氮，然后置于．80"0冰箱保存以备提取RNA用；另一份经固定、脱水、石蜡包埋后切片、常规染色，显微镜下观察并采图。统计学方法荧光定量PCR结果分析，用2出Q的方法将I型、III型胶原与内参基因B．actin做对比，以2。△△Q值对每组样本的I型、III型胶原mRNAJ(I对表达量进行比较分析，2-A,xct位2或≤O．5有统计学意义。结果1．肉眼观光老化组大鼠背部皮肤增厚，粗糙，并出现明显的粗大沟纹。组织病理H

7、E染色镜下可见，光老化组大鼠较对照组表皮增厚，真皮胶原变性、断裂、减少、排列紊乱，甚至凝集呈块状，少量炎症细胞浸润。2．荧光定量PCR结果显示光老化组大鼠皮肤I型、III型胶原△Ct值明显低于对照组，且差异有统计学意义。结论1．选取SD大鼠作为实验动物，操作性强，8周即可完成光老化动物模型的建立。2．光老化模型组比对照组大鼠皮肤的I型、III型胶原的mRNA表达减少。3．选用紫外线光疗仪UVA与UVB联合局部照射SD大鼠，简便易行，可复制性强，成功建立了一种实用光老化动物模型。关键词：皮肤；光老化；动物模型

8、；组织病理；RT-PCRIIAbstractConstructionofskinPhotoagingModelonSprague-DawleyRatPostgraduate：YangliSupervisor：LiDongqinDepartmentofDermatologyandVenereologyTheFirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversityHenanZhengzh