DB32∕T 3274-2017 紫甘薯种苗病毒检测技术规程

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1、ICS65.020.20B23备案号：54543-2017DB32江苏省地方标准DB32/T3274—2017紫甘薯种苗病毒检测技术规程TechnicalregulationforvirusdetectionofPurple-fleshedsweetpotatoseedlings2017-07-01发布2017-08-01实施江苏省质量技术监督局发布DB32/T3274—2017前言本标准按GB/T1.1—2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》的要求编写。本标准由江苏省农业科学院提出并归口。本标准起草单位：江苏省农业科学院粮食作物研究

2、所。本标准主要起草人：边小峰、马佩勇、贾赵东、谢一芝、郭小丁、禹阳。IDB32/T3274—2017紫甘薯种苗病毒检测技术规程1范围本标准规定了紫甘薯种苗的质量要求和检测方法。本标准适用于紫甘薯种薯（苗）繁育、生产、销售过程中的质量鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB4406-1984种薯GB7413-2009甘薯种苗产地检疫规程NY/T402-2016脱毒甘薯种薯（苗）病毒检测技术规程NY/T1200-

3、2006甘薯脱毒种薯3术语和定义下列术语和定义适用本文件。3.1甘薯种苗sweetpotatoseedlings从育种家种子开始，经逐代繁殖增加种薯（苗）数量的种薯生产体系生产出来的种薯（苗）。分为育种家种子、原原种、原种、生产用种四个级别。3.2育种家种子breeder’sseed由育种者直接生产和掌握的原始种子，具有该品种的典型性和遗传稳定性，纯度100%，不带病毒和其他病虫害，产量及其他主要性状符合推广时的原有水平。3.3原原种pre-elite用育种家种子或典型品种的脱毒试管苗在防虫网室、温室条件下生产的符合质量标准的种薯（苗）。3.4原种

4、elite用原原种作种薯，在良好隔离条件下生产的符合质量标准的种薯（苗）。1DB32/T3274—20173.5生产用种certifiedseed用原种作种薯，在良好隔离条件下生产的符合质量标准的种薯（苗）。4缩略语甘薯羽状斑驳病毒（sweetpotatofeatherymottlevirus,SPFMV）。甘薯潜隐病毒（sweetpotatolatentvirus,SPLV）甘薯褪绿斑病毒（sweetpotatochloroticfecksvirus,SPCFV）5质量要求各级别种薯（苗）繁殖田中带病植株允许率应符合表1的要求。表1各级别种薯（苗

5、）繁殖田中允许病毒检出率(%)种薯级别育种家种子原原种原种生产用种苗期00≤5.0≤10.0封垄前00≤3.0≤10.0收获前2周00≤2.0≤10.06检测方法6.1检测样本的选择6.1.1脱毒试管苗对每个单株进行检测。淘汰带毒单株，经检测确定无病毒的才继续扩繁。6.1.2育种家种子、原原种和原种于苗期、封垄前和收获前2周，在目测全田，淘汰显症苗的基础上，采用随机取样法，抽样数量为：面积小于等于0.1hm2，检验2点，每点100株；面积大于0.1hm2小于等于1hm2，检验5点，每点100株；超过1hm2面积，划出另一检验区，按本标准规定面积取样

6、。病毒检测每株取茎蔓上、中、下部叶片各1片，24h内检测（见表2）。6.1.3生产用种于封垄前、收获前2周，在目测全田，淘汰显症苗的基础上，采用随机取样法，面积小于0.1hm2，检验2点，每点100株；面积大于0.1hm2小于等于1hm2，检验5点，每点100株；面积大于1hm2小于等于5hm2，检验10点，每点100株；超过5hm2面积，划出另一检验区，按本标准规定面积取样。取样方法同原种。见表2。注：在进行病毒检测时，原原种每5株混样；原种或生产用种混合后二次抽样，随机抽取10%～50%的混合样品检测，抽取样品最低数量为100株。2DB32/T

7、3274—2017表2各级别种薯（苗）繁殖田中在不同种植面积中的抽样数量种薯级别育种家种子原原种原种生产用种面积≤0.1hm22点2点2点2点0.1hm2＜面积≤15点5点5点5点hm21hm2＜面积≤5hm2划出另一检验区，按本标准规定面积取样10点面积＞5hm2划出另一检验区，按本标准规定面积取样注：每点取样100株6.2酶联免疫检测法当单株苗展开叶达6片以上时进行检测，按株取其上、中、下部叶片用于酶联免疫检测，剩余植株部分继续生长。用酶联免疫检测法初检后，淘汰显阳性反应的单株。6.2.1样品制备将待测叶片用清水清洗干净，从每一样品叶片上各取一

8、直径约1cm圆片，放入样品袋中，加入3mL抽提缓冲液充分研磨，4℃静置30min～40min，取澄清液点样。样品为块根时，