毛细管电泳技术在临床检验医学中应用

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1、毛细管电泳技术在临床检验医学中应用【摘要】本文简要介绍毛细管电泳(cap订laryelectrophoresis,CE)技术的发展概况，重点综述了CE技术在临床检验医学中的应用，并对该技术的应用前景做出了展望。【关键词】毛细管电泳；检验；临床应用基金项目：广西卫生厅课题(项目编号：Z2010014)；桂人口计生研(项目编号：012010001)作者单位：530022广西南宁市人口和计划生育服务中心毛细管电泳又称高效毛细管电泳(highperformancecapillaryelectrophoresis,HPCE),是以

2、毛细管为通道分离带电粒子或离子，以高压直流电场为驱动力，依据样品中各组分之间电泳分配和流速上的差异来实现分离的新型液相分离分析技术。CE是80年代后期迅速发展起来的一项新技术并综合了电泳和色谱技术两者的优点；由于它高效、快速、简便、自动化操作和在检测方面具有高分辨率、高灵敏度、重复性好等诸多特点，在短短几年时间里就已经成为蛋白质、多肽、核酸及其他生物分子分离和分析的一项重要技术［1］。笔者对近年来毛细管电泳技术的概况及其临床检验应用进行综述，旨在为相关研究提供参考。1CE发展概况早期的电泳技术是由瑞典Uppsala大学的

3、Tiselies教授于上世纪三十年代创立的界面电泳，他利用电场将蛋白质分子分成白蛋白和球蛋白等4个区带［2］。随后在1950〜1960年间出现了纸上电泳，这一技术在医学生物实验室被广泛采用，依据大量检测资料使我们对电泳图谱和有关的临床病理相沟通成为可能。另外支持介质不断改进，各种电泳技术的不断更新和应用，使电泳区带分离更清晰，临床应用更为广泛。传统的电泳分离过程会产生焦耳热使电解质溶液的密度发生变化并产生对流扰乱分离区带，使分离度下降，并限制了高压电场的使用，解决问题的方法之一就可以利用小内径的分离管抗对流。前人的研究工

4、作从石英毛管到内径更细的聚四氟乙烯管，尽管当时未获得所理想的的高分离柱效，但这些研究已显示出了细内径毛细管给电泳分离带来的优越性，为CE的发展奠定了理论和实验基础。1981年Jorgenson和Lukacs［3,4］的研究标志着CE的诞生。他们首次使用30kV的高电压和内径为75um的石英毛细管柱，产生出高于40万理论塔板数的分离柱效，他们设计出简单的CE装置并从理论上推导出了毛细管区带电泳(CZE)分离的效率公式。1983年，Hjerten［5］发明了把聚丙烯酰胺凝胶填充在毛细管中的毛细管凝胶电泳(CGE)技术。198

5、4年,Terabe［6］开创了胶束电动毛细管色谱技术(MEKC)O1985年,Hjerten［7］又报道了新的毛细管等电聚焦技术（CIEF）。于同年，Knox［8］等更进一步发展了毛细管电色谱技术（CEC）,他们使用极细的液相色谱的材料来填充毛细管。90年代起CE的技术应用方面有了很大的发展，1990年改进应用紫外检测器，1992年开发应用激发诱导荧光检测器［9］,CE技术得到不断改进和更新，敏感性和分辨率进一步提高。目前以毛细管电泳法为载体的分离分析方法主要有毛细管区带电泳（CZE）、胶束电动毛细管色谱（MECC）、毛

6、细管筛分电泳（CSE）、亲和毛细管电泳（AEC）、毛细管电色谱（CEC）、毛细管等电聚焦电泳（CIEF）和毛细管等速电泳（CITP）等［10］。使得CE技术在临床检验的应用分析领域具有更为广阔的发展前景。2CE在临床检验医学的应用21血清蛋白质分析血清蛋白电泳通常是临床上在无论何种原因引起的血液沉降率增加时都需要进行的常规实验检测项目，它将有助于确诊临床报告的炎症或感染的状况及提示进一步检测其他项目。采用CE可分离血清蛋白，并能准确计算各蛋白质的相对浓度，避免了凝胶电泳法染色、脱色过程中多种影响因素造成的误差，CE法的结

7、果重复性好，可信度高［11］。前清蛋白在血清中的浓度可表明营养状态，且是确定恶性肿瘤、炎症、肝硬化、霍奇金病的重要指标，多数电泳法难以分辨，而用CE法很容易分离定量，检测波长为214或200nmoCE不仅增加了清蛋白部分的分辩率,对双清蛋白血症检测的灵敏度也有了很大的提高。CE提供了足够的在a1区的分辩率以区分a1酸性糖蛋白与a1抗胰蛋白酶。在a2区的球蛋白区，a2巨球蛋白与触球蛋白不易区分，但在B球蛋白区具有高分辩率[12]°CE法对肾病、慢性感染、自身免疫病和肝硬化等多种疾病的免疫球蛋白分析有较好的优势。22单克隆免

8、疫球蛋白的特征鉴别单克隆免疫球蛋白是一种过度合成的单一类型或亚型的异常免疫球蛋白。它的产生是由于单一克隆的恶性或高致敏B细胞的无限增殖，从而产生同源性的单克隆免疫球蛋白。单克隆免疫球蛋白组分的检测运用了各种与免疫学、血液学和生物化学等领域相关的技术和仪器。通过用特异性抗体包被的琼脂糖凝胶球消除一个特殊的峰来指示是哪种