降钙素基因相关肽介导骨折愈合实验探究

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1、降钙素基因相关肽介导骨折愈合实验探究[摘要]目的研究降钙素基因相关肽(CGRP)对骨折愈合的作用。方法36只SD大鼠随机分为A、B、C3组,每组12只,制备右下肢股骨干骨折模型。A组注入重组的pcDNA3.1-CGRP质粒溶液;B、C分别注入单纯pcDNA3.1质粒溶液和磷酸盐缓冲液(PBS)作为对照。分别于2、4周后观察骨折愈合情况和CGRP的表达水平。结果术后2周时,A组动物骨折端有骨性骨痂形成,B、C组未见形成;A组CGRP蛋白相对量(0.438±0.026),明显高于B组(0.186±0.009)、C组(0.173±0.011),差异有统计学意义(P1.

2、2.7CGRP的Westernblot检测术后2、4周两个时间点,取处死动物的骨膜组织,加入1mL细胞裂解液,冰上裂解5min,经超声细胞粉碎仪粉碎后,低温离心10min(12000r/min),取上清加入5XSDS-PAGE蛋白上样缓冲液电泳。转膜封闭后,加入兔抗大鼠CGRP单克隆抗体(1:200),室温过夜;TBST冲洗后加入AP标记的二抗(1:400),孵育1h,加AP显色液显色。应用Image-ProPlus图像分析系统测定平均光密度,并进行统计学分析。1.3统计学方法应用SPSS1&0采用统计学软件进行数据分析,PCR、免疫组化及Westernblot

3、的检测结果的相对值以均数土标准差(x±s)表示,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验,以P0.05)o表3三组CGRP蛋白表达相对量比较(x±s)注:与A组比较,*P[2]VulpianiMC,VetranoM,ConfortiF,etal.Effectsofextracorporealshockwavetherapyonfracturenonunions[J]・AmJOrthop,2012,41(9):122-127.[3]左健,康建敏,潘乐,等•同种异体骨移植用于骨缺损修复的应用现状[J].中国组织工程研究,2012,16(18):3

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8、]王晓云,郭霞,钱忠明,

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