葛根素对2型糖尿病大鼠的膀胱保护作用

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1、葛根素对2型糖尿病大鼠的膀胱保护作用曾祥建万芙蓉冯建华邓丽萍乐有为（深圳市龙岗中心医院518116）【摘要】目的研究葛根素对糖尿病大鼠的膀胱保护作用。方法SD大鼠分为正常对照组、糖尿病组、糖尿病大鼠葛根素干预组三组。以高糖高脂饮食及小剂量连麻佐菌素（30mg/kg）制备2型糖尿病大鼠模型。16周后光镜下观察膀胱逼尿肌在常规HE染色和石蜡切片明胶镀银染色的改变。结果糖尿病组大鼠与正常对照组差异明显，治疗组较糖尿病组明显下降。结论在2型糖尿病大鼠中，葛根素具有保护膀胱逼尿肌功能。【关键词】糖尿病糖尿病膀胱病葛根素【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号]20

2、95-1752（2012）15-0027-02糖尿病膀胱病（DiabeticcystoPathy,DCP）亦称为糖尿病神经原性膀胱（DiabeticNeurogenicBladder,DNB）＞是糖尿病引起的泌尿系统一种严重并发症。DCP是糖尿病患者的常见病发症，其发病率约为25%〜85%[l]oDCP的发病率与患者的年龄及性别没有直接关系，发病率随着糖尿病疾病的病程延长而增加,糖尿病患者10年病程大约有25%的发牛率，超过25年的则发病率大于50%[2]oDCP膀胱结构的改变以及神经病变是目前公认的DCP病因，因此通过葛根素作用于实验性糖尿病大鼠，研究经过葛根

3、素治疗后糖尿病大鼠膀胱逼尿肌形态的变化情况，为防治糖尿病膀胱病寻求一种良好的途径。1材料与方法1.1材料1.1.1实验大鼠SpragueDawley（SD）雌性大鼠40只（暨南大学医学院动物中心提供），体重200g-250g,经12：12h光照和黑暗循环以及充足的水和食物适应性喂养1周后用于实验。1.1.2标准大鼠饲料、高糖高脂饲料（提供公司沈阳嘉乾程牛物科技）；链嫌佐菌素（STZ）（提供公司SIGMA公司）。1.2方法1.2.1T2DM大鼠模型的建立及实验分组SD雌性大鼠40只经12：12h光照和黑暗循环以及充足的水和食物适应性喂养1周后随机分为正常对照组（1

4、6只）、糖尿病组（24只）。正常对照组喂养标准大鼠饲料，糖尿病组喂养高糖高脂饲料（其中含蔗糖10%,熟猪油15%,胆固醇2%,胆酸0.25%）,喂养4周后糖尿病组空腹18-24小时腹腔注射小剂量链月尿佐菌素（STZ）30mg/kg（用前以PH4.40.1mol/L柠檬酸■柠檬酸钠缓冲液配成0.75%的浓度），正常对照组仅注射柠檬酸■柠檬酸钠缓冲液。注射STZ后的第4周，选择空腹血糖大于正常大鼠空腹血糖+3个标准差，口腆岛素敏感性降低者确定为T2DM大鼠纳入实验。对照组给普通饲料，腹腔内注射等体积的枸椽酸缓冲液。连续4周尾静脉血葡萄糖浓度>16・7mmol/

5、L,模型成功24只。在模型成功的II型糖尿病大鼠中随机再分为糖尿病无干预组（12只），葛根素干预组（12只），葛根索按80mg/kg每日腹腔注射1次。对照组正常饲料喂养。16周后制备逼尿肌标本进行光镜观测。1.3标本的收集与处理大鼠分别于糖尿病组大鼠的实验终体重和空腹血糖值。处死后测量膀胱湿垂，并用膀胱湿重与相应人鼠体重的比值作为膀胱相对重量。1.4标本的制备及观察方法常规苏木素■伊红（HE）染色、常规石蜡切片明胶镀银染色，在低倍镜和高倍镜下观察苏木素■伊红（HE）染色下膀胱粘膜、固有层及膀胱肌层异同。常规观察，实验组与对照组对照观察。石蜡切片明胶镀银染色中观察

6、神经纤维的改变情况。1.5统计学处理结果应用SPSS13.0统计软件包进行数据分析，以均值±标准差（x-±s）表示，组间比较应用方差分析。2结果2.1.1苏木素■伊红（HE）染色正常组：低倍镜下对照组可见膀胱粘膜皱襲明显，上皮移行细胞排列均匀，核圆形位于细胞中央，一般分为2・3层，固有层血管神经多见，肌层增厚,可见纵形肌，环形肌，平滑肌横断以及纵行切断的肌束排列整齐。肌束之间结构紧密，间隙可见大量结缔组织。少许紊乱，肌束体积增加外形饱满。肌束间隙明显增宽，间隙间可见少量胶原纤维。糖尿病组以上所述形态改变较治疗组明显变重，膀胱粘膜皱嬖较

7、前明显减少，上皮细胞厚度减小，固有层血管减少、胶原增加，逼尿肌基底层明显变薄，逼尿肌肌束排列较紊乱，肌束外形明显体积。肌束之间间隙加大，间隙间血管神经减少，肌束间胶原纤维增多。2.1.2石蜡切片明胶镀银染色在石蜡切片明胶镀银染色中神经末梢为黑色，神经胶质纤维为蓝黑色。对照组大鼠粘膜下、肌间中染成黑色和蓝黑色的神经纤维多见。治疗组人鼠膀胱标本显示肌肉间神经纤维也减少。糖尿病组逼尿肌肌束间隙间神经纤维较对照组及治疗组明显减少，细小的神经纤维少见。2.2对照组与糖尿病大鼠组不同吋段的体重、膀胱湿重和血糖值相应时间糖尿病大鼠比正常组及膀胱膀胱重量增加明显(P<0.01)

8、,而且膀胱相对重量增加更