黄瓜西瓜花叶病毒(wmv)抗性的遗传研究和基因定位

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1、GeneticAnalysisandGeneMappingofMosaicVirus(WMV)1h■·●一’ResistencelnUucumberThe："submittedt01laeslssul9mlttedtodaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeof—MasterofAgonomy，一一ZhouJian(DepartmentofGardenandHolticulture)Supervisor：Prof．ChengFeiandProf．GuXingfang

2、Qingdao．ChinaJune．2012独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得青岛农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：周健时间：io：2_年占月彳日关于论文使用授权的说明本人完全了解青岛农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩

3、印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意青岛农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研究生签名：周健时间：20：2年石月％日跏签名镀韭帆刃／2钐月旃青岛农业大学硕士学位论文摘要黄瓜西瓜花叶病毒病(WMV)抗性的遗传分析和基因定位摘要西瓜花叶病毒是侵染葫芦科的重要病毒之一，其在黄瓜上的流行受到人们的关注。传统的病毒检测方法受毒源、接种环境等限制，缺乏快速检测方法。近几年来，分子标记技术被应用于多方面。分子标记辅助育种技术，相对于传统育种，可以缩短育种周期，并且可从分子水平上找到抗病基因或与

4、抗病相关的QTL位点。本试验利用高代自交系“65G”(感病)和“228”(抗病)构建的六世代群体，对WMV进行了遗传规律的分析，并利用黄瓜基因组SSR引物对WMV的抗病基因wmv进行了定位。结果如下：1．通过对以高代自交系“65G”和“228"构建的六世代群体进行WMV苗期鉴定。发现Fl全感病，以65G回交的群体全感病，以228回交的群体一半感病、一半抗病，F2感病与抗病比为3：1。试验表明，该遗传群体对WMV的抗性是由隐性单基因控制的。2．根据前人研究结果和黄瓜基因组序列综合分析，挑选黄瓜6号染色体上的243对SSR引物，再结合BSA法进行分析，获得具有

5、多态性的引物1ll对，引物多态性为45．7％。BSA建池筛选后，初步获得20对标记可能与wmv连锁，通过Joinmap4．0做连锁图，最终将wmv定位在黄瓜6号染色体上，wmv位于标记SSRl7604和SSRl7591之间，遗传距离分别为5．6cM和25．8cM。根据前人研究和本课题现有的标记在wmv初定位区间寻找并增加6个新标记后，wmv被进一步定位到SSRl0449和SSRl6005之间，遗传距离分别是2．9cM和0．3cM。3．对SSRl6005和SSRl0449之间的序列进行分析，发现wmv定位区域的物理距离约为416．5Kb，定位区间有88个候选

6、基因，其中5个与抗病基因相关。4．利用获得的与wmv紧密连锁的3个侧翼标记SSRl6005、SSRl0449和UW016108对28个不同遗传背景的黄瓜材料进行验证，结果SSRl6005的准确率为78．5％，SSRl0449和UW016108的准确率均为89．3％。使用三个标记相互印证进行验证的准确率可达96．4％。关键字：黄瓜：删；遗传规律：抗性基因：分子标记青岛农业大学硕士学位论文摘要GeneticAnalysisandGeneMappingofCucumberAbstractResistanceinWatermelonmosaicvirusisavi

7、talvirusinCucurbitaceae．Itisofgreatconcernincucumber．Conventionaltestmethodsofviruswerelimitedbecausethesemethodscanbeaffectedbyvirusresourcesandinoculationenvironmenteasily．Nopreciseandrapidvirustestmethodshavebeenreportedincucumberbreeding．Moleculartechnologiesareusedinmanyfield

8、snowadays．Thetechnologyofmarker-a