红菜薹细胞质雄性不育系eru-3a的遗传鉴定

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1、华中农业大学硕士学位论文红菜薹细胞质雄性不育系Eru--3A的遗传鉴定姓名：邵明珠申请学位级别：硕士专业：蔬菜学指导教师：徐跃进201206红菜薹细胞质雄性不育系Eru．3A的遗传鉴定摘要本实验研究是一种新型不育源甘蓝型油菜细胞质雄性不育系(eruCMS．2n=4X=38AACC)与红菜薹(AcampestrisL．sspChinensisL．vatutilisTsenetLee．2n=2X=20AA)俞优通过远缘杂交多代回交获得了比较稳定的红菜薹不育系，通过植物性状分析、细胞学分析、同工酶分析、分子鉴定对该不育系进行遗传鉴定，结果如下：1．通过田间农艺性状的调查及观察表明，此胞质不育

2、系在生长期的形态指标(例如：株高、开张度、最大叶片长和宽等)己趋近于父本红菜薹俞优，但在花器官的形态上，三者在雄蕊长、花丝长、雌雄蕊的高度差存在极显著差异，红菜薹不育系处于中间，而且通过了多年观察以及花粉活力的测定，表明该不育系是可以稳定遗传、败育彻底的细胞质雄性不育系。2．采用石蜡切片方法，对新型红菜薹细胞质雄性不育系Eru．3A及其保持系俞优的花药发育过程进行细胞学观察，以确定其花药败育的时期、方式和特点。研究结果表明：此红菜薹胞质不育系的花药败育发生于单核小孢子早期，表现为绒毡层细胞异常膨大，挤压单核早期小孢子，从而导致其败育。3．通过对甘蓝型油菜细胞质雄性不育系(eruCMS)

3、和红菜薹不育系Eru．3A及保持系俞优的叶片、叶柄、薹、不同大小花蕾及花中POD、COD、EST同工酶进行酶谱分析表明：在中蕾的红菜薹不育系的同工酶POD比对应的保持系俞优多1条Rf=-0．257的酶谱带，有可能与不育相关，而在叶片和苔中分别少Rf=-0．227和Rf=0．272和0．788的酶谱带；红菜薹不育系的同工酶COD在叶片和叶柄中分别少Rf-=0．476和Rf=-0．754酶谱带，但在大、中蕾中比保持系俞优多1条酶谱带(Rf=-0．411)，这表明它是花蕾中特征谱带；同工酶EST中，红菜薹保持系俞优表现比红菜薹不育系多的酶谱带，分别在叶片、叶柄、中蕾中各多1条酶谱带，但在小蕾

4、中表现少Rf=0．463酶谱带和多Rf=-0．444和Rf=0．484酶谱带。4．根据己报道的油菜育性相关基因atp6，orfl38，orf224-atp6，atp6-orf263，orf222．nad5．orfl39的特异引物对红菜薹不育系Eru．3A及其保持系俞优和4个已知的不育类型的不育系材料的DNA进行PCR扩增，回收特异条带进行测序，根据实验结果初步推测：红菜薹细胞质雄性不育系具有Ogura不育胞质。关键字：红菜薹细胞质雄性不育；PCR扩增；细胞学分析；花药败育；同工酶华中农业大学2012届硕士学位论文AbstractAnewkindofcytoplasmicmalester

5、ilityofBrassicanapus(eruCMS)wastransferedtopurplecai-taibythewayofdistanthybridizationoccurringbetweendifferentgenuses，Soweobtaincorrespondingmalesterilelineofpurplecai-tai．Analysisesonbotany，cytology，isoenzymeandPCRamplificationwerecarriedout．Theresultswereasfollow：1．Analysisonbotanyofthecytopl

6、asmicmalesterilityofHongCai—tai．111efieldsurveyandagronomiccharactersobservedthatthecytoplasmicsterilelinesinthegrowingperiodofmorphologicalindex(forexample：plantheight，openmeasure，leaflengthandwidthetc)hasbeenclosetOthemaleparentHongCai-taYuyou，butintheflowerorganformation，therewereverysignific

7、antlydifferencesinstamenlength，silklengthandheightdifferenceofpistilandstamen,thecytoplasmicmalesterilityofHongCai-taiofflowerorganformationWasinthemiddle．Throughthedeterminationofthepollenvigorandobservationinpastyears，show