枸杞多糖对海马神经干细胞损伤的保护作用及对海马神经干细胞增殖分化作用的研究

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1、分类号：R3单位代码：10752密级：公开学号：2009071宁夏医科大学硕士研究生学位论文枸杞多糖对海马神经干细胞损伤的保护作用及对海马神经干细胞增殖分化作用的研究Lyciumbarbarumpolysaccharideprotectshippocampalneuralstemcellsfrominjuryandpromotestheirproliferationandneuronaldifferentiation学位申请人：陈维维指导教师：田建英教授申请学位门类级别：医学专业名称：人体解剖与组织胚胎学研究方向：神经生物学所在

2、学院：基础医学院论文完成日期：二〇一二年四月宁夏医科大学研究生学院NingxiaMedicalUniversityThesisforApplicationofMaster’sDegreeLyciumbarbarumpolysaccharideprotectshippocampalneuralstemcellsfrominjuryandpromotestheirproliferationandneuronaldifferentiationStudent’sName:ChenWeiweiSupervisor:TianJianying

3、SubjectCategory:MedicalScienceMajor:HumanAnatomyandHistology-EmbryologySpecialty:NeurobiologySchool:BasicMedicalCollegeCompletionDate:April2012宁夏医科大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献

4、的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名＿＿＿＿＿论文导师签名＿＿＿＿＿年月日年月日宁夏医科大学关于学位论文使用授权的声明宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文，同意学校按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权宁夏医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名＿＿＿＿＿论文导师签名

5、＿＿＿＿＿年月日年月宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要摘要第一部分：氯化甲基汞慢性暴露对新生鼠学习记忆的影响及枸杞多糖干预的实验研究目的探讨环境污染物氯化甲基汞（methylmercurychloride，MMC）低剂量慢性暴露对新生鼠学习记忆和海马神经干细胞(neuralstemcell，NSCs)的损伤作用以及枸杞多糖（lyciumbarbarumpolysaccharide，LBPs）对其毒性损伤的早期干预作用，为寻找机体抵抗环境污染物氯化甲基汞的新途径提供实验依据。方法（1）选雄性SD新生鼠60只，随机分为对照组、模

6、型组、干预组。模型组和干预组颈部皮下注射MMC（4mg/kg·d），共注射28天。对照组颈部注射相同剂量的生理盐水。干预组哺乳式喂养LBP(2g/kg·d)。设3、6、9周三个时间窗，行为学检测采用Morris水迷宫测定新生鼠逃避潜伏期、跨台次数，免疫荧光染色观察新生鼠海马齿状回内新生神经元的数量和形态变化。（2）分离、培养和鉴定胚胎鼠海马NSCs，用MTT法检测不同浓度MMC(100pmol/L、1nmol/L、10nmol/L、100nmol/L、1μmol/L)处理后海马神经干细胞的存活水平，以分析MMC对海马NSCs的毒

7、性作用程度；然后分别用适合浓度的MMC和LBPs处理海马神经干细胞，采用免疫荧光法观察海马NSCs的增殖、分化及神经元突起发育的形态。结果(1)与对照组相比，模型组逃避潜伏期延长，跨台次数明显较对照组少，干预组的逃逸潜伏期和垮台次数较对照组没有明显变化，但干预组较模型组有明显缩短，垮台次数明显增多，干预组海马齿状回DCX阳性神经元和对照组相比没有明显变化，模型组和对照组相比，海马齿状回DCX阳性神经元减少，LBPs干预组海马齿状回DCX阳性神经元和模型组相比较，其阳性神经元数目明显增加，并呈时间依赖性递增。(2)MMC处理海马N

8、SCs细胞存活率呈浓度依赖性递减，海马神经干细胞在浓度100nmol/L以上环境中均死亡，在加入LBPs后，海马NSCs存活率显著提高，分化为神经元的数目增多，突起增长。结论(1)MMC低剂量慢性暴露可直接导致新生鼠空间学习记忆的损伤，可能与海马齿状回DCX阳性