广东钩藤属植物的活性成分含量测定及其药理作用的研究

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1、南方医科大学2009级硕士学位论文广东钩藤属植物的活性成分含量测定及其药理作用的研究Contentsdeterminationoftheactiveingredient●J1一一’’1nGUangdOngUncarlagenusanditsPharmacologicalActions课题来源：国家自然科学基金资助项目(No．30828033，No．81173581)专业名称学位申请人指导教师中药学严愉妙莫志贤教授答辩委员会主席梁荣能教授答辩委员会成员于荣敏教授张文清教授翁建霖教授张继平教授史珏副教授莫志贤教授论文评阅人刘法锦研究员马骥教授2012年4月1闩广Ⅲ硕士学位论文11111

2、11IIIIIIIIIIIII11111111IIlY2256935广东钩藤属植物的活性成分含量测定与药理作用的研究硕士研究生：严愉妙指导教师：莫志贤教授摘要研究背景茜草科(Rubiaceae)钩藤属(Uncaria)植物全世界约有34种，分布于亚洲、澳大利亚、非洲大陆及马达加斯加、热带美洲。我国有11种、1变型，分布于广东、广西、云南、江西、湖南、福建、贵州、四川等省区。其中，广东产6种，即：钩藤Uncariarhynchophylla(Miq)Miq．exHavil一大叶钩藤UmacrophyllaWall．、毛钩藤UhirsuteHavil．、无柄果钩藤(白钩藤)Usessi

3、lifruclusRoxb．、侯钩藤UrhynchophylloidesHow和攀茎钩藤U．scandens(smith)Hutch．，主要分布于粤西北一带，资源丰富。传统中药钩藤味甘，性凉，归肝、心包经，具有清热平肝，息风定惊等功效。《中华人民共和国药典》2010年版记载正品钩藤包括：钩藤Uncariarhynchophylla(Miq)Miq．CXHavil．、大叶钩藤UmacrophyllaWall．、毛钩藤UhirsuteHavil．、华钩藤Usinensis(Oliv．)Havil．和无柄果钩藤UsessilifructusRoxb．。现代临床药理研究表明，中药钩藤对高血

4、压、头痛、眩晕等有确切的疗效。该属植物含有吲哚类生物碱、三萜类化合物和黄酮类化合物等多种化学成分，其中吲哚类生物碱为主要的有效部位。目前，对广东省钩藤属植物资源尚缺乏一个全面和系统的研究，掘调查广东省钩藤属药用植物资源丰富，具有较高的中文摘要研究价值。近年来的研究表明，钩藤不仅其传统药用部位——带钩茎枝是一种药用资源，钩藤的叶、藤茎(不带钩茎枝，下同)也有作为药用资源的潜力，其来源更为丰富，药用价值及综合利用潜力都很大，但由于缺乏对广东省钩藤属植物的不同物种、不同药用部位的药学和药理毒理学系统、全面的研究，故一直没有被开发利用。研究目的对广东所产4种钩藤属植物进行不同物种、不同药用

5、部位的总碱和3个有效成分钩藤碱、异钩藤碱及毛钩藤碱的含量测定；比较4种钩藤属植物不同药用部位的中枢抑制作用。建立一个适合广东所产4种钩藤属植物生物碱成分的高效液相色谱法和紫外分光光度法的检测条件，比较其不同物种、不同药用部位问有效成分的含量变化，为这一药用植物新资源的合理开发利用提供药学及药效学依据。实验方法1．钩藤生物碱提取方法的比较：选用冷浸法、热回流提取法、超声提取法3种方法，在此基础上分别比较多种提取溶剂(石油醚、80％乙醇、无水乙醇、甲醇、乙醚、氯仿)的提取效果。2．建立紫外分光光度法(UV)检测广东所产钩藤属植物钩藤、大叶钩藤、毛钩藤和侯钩藤的不同药用部位生物碱含量，分

6、别以钩藤碱、毛钩藤碱为对照品计算总碱含量，检测波长分别为242nm、245nm。3．建立高效液相色谱法(HPLC)检测上述4种钩藤属植物的带钩茎枝、藤茎和叶3个药用部位的钩藤碱、异钩藤碱和毛钩藤碱含量：①采用HPLC等度洗脱法测定钩藤属植物中有效成分钩藤碱、异钩藤碱的含量，色谱条件：依利特HypersilODSC18柱(4．6mm×200mm，5um)；甲醇-水(含0．50％三乙胺，冰硕士学位论文乙酸调pH6．33)=63：37为流动相，流速O．80mL·min一；进样量为5．00uL；柱温为室温；检测波长为245nln。②．采用HPLC梯度洗脱法测定毛钩藤碱含量，色谱条件：以依利

7、特HypersilODSC18柱(4．6mmx200mm，5¨m)为色谱柱，甲醇一水(含0．50％三乙胺，冰乙酸调pH5．35)为流动相，梯度洗脱，进样量为10．00¨L；柱温为40℃；检测波长为245nin。4．4种钩藤属植物不同药用部位中枢抑制作用的比较研究①小鼠自发活动实验昆明}ood,鼠90只，雌雄各半，禁食12h，饮水不限。将小鼠随机分为9组，即空A对照组(IN容量生理盐水组)，大叶钩藤带钩茎枝组(1Sg·kgJ)、大叶钩藤叶N(15g'kg。)、钩藤带钩茎