不同温度下盐酸吗啡对肥须亚麻蝇幼虫的影响及法医学意义

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1、河北医科大学硕士学位论文不同温度下盐酸吗啡对肥须亚麻蝇幼虫的影响及法医学意义姓名：张楠申请学位级别：硕士专业：病原生物学指导教师：李泽民201203中文摘要不同温度下盐酸吗啡对肥须亚麻蝇幼虫的影响及法医学意义摘要目的：研究石家庄地区优势蝇种肥须亚麻蝇(Parasarcophagaerassipalpi)在不同的环境温度和不同浓度的盐酸吗啡作用下的生长发育情况，探索温度和毒物对肥须亚麻蝇幼虫口钩和咽骨的影响，积累石家庄地区尸源性蝇类的法医昆虫毒理学(forensictoxicologicentomology)资料，从而为死后间隔时间(postmortemi

2、nterval，PMI)的推断提供科学依据。方法：在河北医科大学校园内以大鼠内脏诱捕肥须亚麻蝇，带回实验室，在培养箱内连续饲养，以第三代作为母代观察其在盐酸吗啡影响下的生长发育。设定培养箱的温度依次为28℃、32℃、36℃，相对湿度为75％，光照周期为12h：12h，保持温度和光照周期恒定。本实验共使用家兔4只，随机分为对照组和3个实验组。对照组家兔经耳缘静脉注射生理盐水lml／kg，实验组家兔经耳缘静脉依次注射0．5倍、1．0倍、2．0倍致死剂量的盐酸吗啡，给药30min后将4只家兔处死，处死方法均为重击其枕部迅速致死。取家兔的肌肉组织分别保存，对照组

3、标记为M0，实验组依照给药浓度从d,N大依次标记为M1、M2、M3。用新鲜猪肝诱肥须亚麻蝇产幼虫，产幼虫时间记为零时，将幼虫移至家兔的肌肉组织上饲养。幼虫产出12小时后，每隔12d'时留取标本一次，每组每次留取10头幼虫，直至幼虫达到离食期。将幼虫用80℃热水烫死，然后放入浓度为70％的甘油酒精中保存。头咽骨形态学观察及测定从保存液中取出幼虫标本后，吸干表面液体，放在培养皿上，用大头针在幼虫腹部一侧扎几个小孔，放入10％的KOH溶液中消化内部组织，24h后将幼虫从KOH溶液中取出，放在培养皿上用镊子轻轻按压幼虫，直至将体内已消化的组织排出。幼虫在清水中洗

4、净数遍后，在体视显微镜下分离出幼虫的头节，然后将头咽骨进行对称分离。标本依次用30％、50％、70％、80％、90％、95％、100％的酒精、100％酒精与二甲苯的混合液(比例1：1)逐级脱水，最后用二甲苯透明，显微镜下整姿后滴加拿大树胶封片，置于阴凉处风干。光学显微镜下观察、拍照。利用计算机图像分中文摘要析系统对头咽骨的口钩及咽骨的面积、骨化面积和平均光密度等多项指标进行测定。结果：1在温度恒定时，随着盐酸吗啡浓度的增高，肥须亚麻蝇幼虫的生长速度在一定程度的加快；同样，当盐酸吗啡浓度恒定时，随着温度的升高，肥须亚麻蝇幼虫的生长发育速度加快。2在恒定的温

5、度和药物浓度时，随着时间的延长，肥须亚麻蝇幼虫头咽骨的颜色从浅棕黄色逐渐加深直至变为黑褐色，同时，骨化程度逐渐加强，骨化面积不断加大。附口骨，形似点状，在三龄期可以观察到。3肥须亚麻蝇幼虫的口钩面积和咽骨面积均随时间的延长不断加大，在叠龄期时变化较剧烈，直至进入三龄期后很快达到最大值，并进入平台期，维持基本恒定。由此可见，两者并不能有效地适用于推测PMI。4肥须亚麻蝇幼虫口钩的骨化面积和平均光密度的变化趋势是一致的；同样，咽骨的骨化面积和平均光密度的变化趋势也是一致的。其均为推测PMI的指标。这是由于：肥须亚麻蝇幼虫口钩的骨化面积和光密度及咽骨的骨化面积

6、和光密度在三个龄期中均随时间的延长而逐渐增高，直至三龄期结束。肥须亚麻蝇幼虫的口钩和咽骨的骨化面积和光密度达到最大值的时间明显滞后于二者面积达到最大值的时间。结论：1在盐酸吗啡浓度恒定时，随着温度的升高，肥须亚麻蝇幼虫的生长发育加快；在温度恒定时，随着盐酸吗啡浓度的增高，幼虫的生长速度亦在一定程度的加快。2在恒定温度恒定药物浓度时，从一龄期到三龄期，幼虫头咽骨颜色由浅棕黄色逐渐加深至黑褐色，几丁质化程度随时间延长而逐渐加强，骨化面积也随时间延长而不断增大。在三龄期开始出现点状的附口骨。3随时间的延长，肥须亚麻蝇幼虫口钩面积和咽骨面积逐渐增加，叠龄期增长显

7、著加快，而进入三龄期后很快达到最大值，并维持不变，故幼虫口钩面积和咽骨面积不是推断PMI的理想指标。4肥须亚麻蝇幼虫的口钩骨化面积、平均光密度，及咽骨的骨化面积和平均光密度，上述指标均随时间的延长呈现持续性增加的趋势，并一直维持到三龄期后，故此四项指标是推测PMI的理想指标。中文摘要关键词：法医昆虫毒理学；肥须亚麻蝇；盐酸吗啡；浓度；温度；死后间隔时间；口钩；咽骨；骨化面积；平均光密度；生长速度_--l一_———————————————————————————————————————一3英文摘要-——————_—_————_——--——●_———-—_-

8、——_-_-——_-——●——————————_——-●—_’——●__-_—●