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1、分类号S813.3学校代码10129UDC636学号2009201014CPT基因在绵羊和山羊不同肌肉组织的表达分析CPTGeneExpressionAndAnalysisinMuscleTissueofGoatandSheep申请人:于宝莉学科门类:农学学科专业:动物遗传育种与繁殖研究方向:绒山羊遗传育种原理与方法指导教师:李金泉教授张文广教授论文提交日期:二〇一二年六月摘要本研究以山羊及绵羊为材料从心脏、肝脏、脾脏及部分骨骼肌等中提取总RNA,克隆、测序得到绵羊和绒山羊CPT1A、CPT1B和CPT2基因部分的cDNA序列,并且应用荧光定量PCR技术研
2、究这些基因在山羊及绵羊各组织中的表达情况。利用QPCR技术得到CPT1A、CPT1B和CPT2基因部分cDNA序列,经克隆、测序得到的核苷酸序QPCR分别为304bp、232bp和214bp。对CPT1A、CPT1B和CPT2核苷酸序列进行生物信息学分析发现山羊及绵羊CPT1A、CPT1B和CPT2基因序列与牛CPT1A、CPT1B、CPT2基因之间具有较高的保守性。山羊及绵羊CPT1A基因与牛的相似性高达97%,山羊CPT1B基因与绵羊和牛的相似度都是99%,山羊CPT2基因与牛CPT2基因的相似度高达98%。采用定量PCR(Quantification
3、PCR,QPCR)方法比较分析了肉碱棕榈酰转移酶CPT基因在山羊和绵羊不同组织中的表达情况。羊CPT(1A、1B、2)基因组织表达谱结果表明,这三个基因在所检测的43个组织中均有表达,这说明CPT(1A、1B、2)基因在羊体内是一个广泛表达的基因。CPT2基因在绵羊背最长肌中表达最低。CPT(1A、1B、2)各基因在绵、山羊各组织中的表达存在差异,可能与各基因表达模[1]式、肌肉组织纤维类型不同、脂肪沉积含量不同等因素有关。关键词:山羊;绵羊;肉碱棕榈酰转移酶;骨骼肌;PCRCPTGeneExpressionAndAnalysisinMuscleTissu
4、eofGoatandSheepAbsaractInthisstudy,thegoatsandsheepforthematerialsextractedfromtheheart,liver,spleen,andskeletalmuscletotalRNA,cloning,andsequencingofthesheepandgoats,partofthecDNAsequenceofCPT1A、CPT1BandCPT2gene,real-timequantitativePCRingoatsandsheeptissueexpression.TheQPCRtechn
5、icalCPT1A,CPT1BandCPT2genepartialcDNAsequences,thenucleotidesequencebycloning,sequencing,QPCR,respectively,304bp,232bpand214bp.BioinformaticanalysisofCPT1A,CPT1BandtheCPT2nucleotidesequencefoundbetweengoatsandsheepCPT1A,CPT1BandCPT2genesequenceofbovineconservative.GoatsandsheepCPT
6、1Ageneandthesimilarityofthecattleupto97%,99%ofthesimilarityofthegoatCPT1BgeneofsheepandcattlearetheCPT2genewithsimilarityofcattleupto98%.UsingQuantificationPCR,(QPCR)analysisofcarnitinepalmitoyltransferaseenzymeCPTgeneexpressionindifferenttissuesofgoatsandsheep.SheepofCPT(1A,1B,2)
7、genetissueexpressionspectrumresultsshowthatthesethreegeneswereexpressedinthedetectionof43organizations,whichshowsthattheCPT(1A,1B,2)geneonthesheep'sbodyisawidelyexpressedgenes.CPT(1A,1B,2)geneexpressioningoatsandsheeptissuedifferencesmaybeassociatedwitheachgeneexpressionpatterns,d
8、ifferenttypesofmuscletissuefibers