河南省镇平县第一高级中学2018届高考生物知识点复习：基因工程总结

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1、专题一基因工程一、基因工程的概念概念：对概念的理解：1、操作环境:2、操作对象:3、操作水平4、纟吉果；5、特点；6、变异类型o二、基因工程的基本工具（3种工具，其中2种是工具酶）1、（“分子手术刀”）①特点：一种限制酶只能识别DNA的一种核昔酸序列，并在特定的位点切割DNA；a、限制酶识别与切割的核昔酸序列关于中轴•线两侧反向对称：最常用的限制酶是:,它所识别的核昔酸序列是,切割的化学键是o两个不同的DNA分.子用同一种限制酶切割，会产生，然后让二者的黏性末端黏合起来，再用一定手段处理就可以得到重组的DNA分子。b、1个线性DNA分子上有1个限制酶切割位点，酶切

2、后变成2段；有2个酶切位点，切后变成—段。1个环状DNA分子上有1个酶切位点，切后变成—段。②来源：主要来自于;打开的化学键：:③切割后的结果：产生「和;2、（“分子缝合针”）①可将双链DNA分子片段“缝合”起來，恢复两个脱氧核昔酸之间的键;②DMA连接酶的种类：和o两种DNA连接酶分别来自于哪种生物？“缝合”的末端有什么不•同？3、（“分子运输车”）①作用：一是用它作为运载工具，将目的基因送到宿主细胞中去；二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。②常用运载体：、和2其中，最常用的运载体是，它的化学本质：.O③运载体需具备的条件（特点）：a、能够在；b、具有

3、,以便与外源DNA连接；c、具有,便于进行筛选。三、基因工程的基本操作步骤①;②;③;④1、目的基因主要是指，也可以是一些具有的因子。2、获取目的基因的常用方法（准确记忆）①从基因文库中获取；②利用PCR技术扩增；③人工合成3、什么是基因文库？（课本P9,了解概念即可）①基因文库的分类：和（如：cDNA文库）。②基因文库的构建a、基因组文库的构建：某种生物的全部DNA->限制酶切割成许多小片段一与载体连接并导入受体菌储存起来；（了解即可）b、cDNA文库的构建：提取生物某发育时期的mRNA-*单链DNA-双链的cDNA（只含某种生物的部分基因）一限制酶切割成许多小

4、片段一与•载体连接并导入受体菌储存起来；（了解即可）「c、基因组文库与部分基因文库（cDNA文库）的对比（课本P10）从文库大小，基因多少，是否含启动子、终止子、内含子等方面进行比较4、PCR技术（聚合酶链式反应/多聚酶链式反应）①PCR的含义：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。目的：获取大量的目的基因原理：DNA双链复制②过程：加热至90〜95°CDNA解链为单链；一->冷却到55〜60°C,引物与两条单链DNA结合；一->加热至70〜75°C,DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。等。③PCR所需的条件：模板、5、人工合成目的基因的要求：,核

5、昔酸序列已知。五、构建基因表达载体1、目的：使目的基因在受体细胞小稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用（课本P11）。或者可以这样概括：使目的基因在受体细胞中能够复制、转录和翻译。（更易记忆）2、基因表达载体包含哪些部分？、、、等3、关于启动子、终止子、标记基因启动子是位于基因首端的一段特殊的DNA片段，它是识别和结合的位点。有了它才能驱动基因转录出mRNA,最终获得蛋白质。启动子的作用：，o终止子的作用：标记基因的作用：（课本P11）六、将目的基因导入受体细胞1、什么是转化？（见课本P12）目的基因进入受体细胞，并在受体细胞中的过程

6、。2、将目的基因导入植物细胞的方法①农杆菌的特点：农杆菌易感染和,而对大多数单子叶植物没有感染能力。②农杆菌转化法的原理：Ti质粒上的可以转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体的D7A上。（课本P12图1-11）③将目的基因导入植物细胞时，可以用受精卵或者植物的体细胞。3、将目的基因导入动物细胞的方法：。将目的基因导入动物细胞时，•要用动物的受精卵。原因：O4、将目的基因导入微生物细胞的方法：o①原理：用处理微生物，使之处于,表达载体与感受态细胞混合，感受态细胞吸收DMA分子。（感受态细胞的特点：非常容易吸收DM分子）②用微生物作为受体细胞的优点：o七、目的基因的

7、检测与鉴定1、分子水平上检测分子水平上检测目的•基因是否导入受体细胞，方法；C用的是DNA与DNA杂交）分子水平上检测目的基因是否转录出了mRA,方法；（但用的是DNA与mRNA杂交）分子水平上检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法；什么是基因探针？（课本P14图1-14）即用放射性同位素或荧光物质标记的一小段单链的目的基因片段。2、个体水平的鉴定：例如抗虫鉴定、抗病鉴定等，用虫或病原微生物进行接种实验。八、蛋白质工程1、概念：蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过或,对进行改造，或制造一种,以满足人类的生产和生活的需求。（课本P27）

8、2、蛋白质