李珊开题报告书新

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1、附件4《楚雄师范学院本科毕业论文（设计）开题报告》楚雄师范学院本科毕业论文（设计）开题报告书目酶解•醇姓名李珊学号20081051248系（院）化学与生命科学系专业化学（师范类）指导教师宋建梅2012年3月11日论文(设计)题目酶解-醇提法提取紫藤茎中总黄酮的探究选题的动因与根据(说明选择本课题的理论价值、实践意义；综述国内外有关本课题的研究动态及见解)黄酮类化合物(flavonoids)是一类在植物中分布广泛、具有多种生物活性的多酚类化合物，黄酮类化合物具冇抗癌、抗衰老、抗辐射等作用叫因此，黄酮类物质的研究也进行地比较广泛⑵。紫藤(W

2、isteriasinensis)乂名朱藤、藤罗，豆科紫藤属落叶藤木树种，分布于我国西北、华北及长江流域诸省C3］。紫藤花具有浓郁的香味，其性微温、味甘，具冇利水消肿，散风止痛的功效，主治腹水浮肿，小便不利，关节肿痛及痛风等症。为了有效的开发和利用紫藤茎中的黄酮类物质，本课题利用有机溶剂提取法对紫藤茎中黄酮的提取进行了探究。根据所查阅的资料，耳前对黄酮的提取主要方法有超声波法、有机溶剂提取法、微波法、嗨解法、大孔树脂吸附法等⑷。然而，目前没有人采用纤维素酶法提取紫藤茎中黄酮类物质。据了解，酶解技术是新兴的天然活性物质提取辅助技术，能有效提

3、高多种活性物质的提取率。复合纤维素酶可以降解纤维素等多糖类物质，这些物质的水解会导致细胞壁部分破损、细胞膜通透性增加，从而加速总黄酮的释放，提高其提取率⑸。本课题选用紫藤茎为原料，尝试用纤维素酶法从紫藤茎中提取总黄酮，并考查最佳捉取条件，以芦丁为参照测定紫藤茎总黄酮的含量，课题的完成将为紫藤茎屮总黄酮的提取方法提供帮助。课题的主要内容：1、原料处理2、黄酮类化合物的提取3、黄酮类化合物的定性检验4、黄酮类化合物的提取条件(1)单因素实验(2)止交实验5、总黄酮含量的测定6、得出结论研究方法：1、原料准备流程紫藤茎一清洗一烘干一粉碎2、提

4、取工艺流程用纤维素酶酶解原料一乙醇浸提一提取液一成分鉴定一含量测定3、操作方法⑴芦丁标准曲线的绘制准确称取10mg芦丁，用70%乙醇溶液溶解，定容至lOOmLo之后将芦丁溶液用70%乙醇稀释成0、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50ug/mL,各吸取ImL于试管中，加70%乙醇ImL,加入0.3mL5%亚硝酸钠,6min后加入0.3mL10%亚硝酸铝,6min后再加入2mL2mol/L氢氧化钠,lOmin后丁分光光度计波长510nm下测吸光度。根据数据结构，利用微软电了表格软件进行线性冋归和绘制标准曲线。求岀回归方程

5、并找岀R值。(2)黄酮类化合物的提取准确称取一定量的纤维素酶，用一定pH值的溶液与l.Og紫藤茎粉末混合均匀，在一定的条件下浸提，过滤，得提取液。(3)定性试验——总黄酗的鉴别①紫外光下呈色反应：取提取液点在滤纸上，若在可见光下呈灰黄色，在紫外光下呈灰褐色并有荧光斑点，则说明有黄酮。①浓氨水反应：取该样品溶液点在滤纸上，将滤纸在氨水上方熏0.5min,立即在紫外光下观察，若呈极明显的黄褐色荧光斑点，则说明有黄酗。②三氯化铝反应：取提取液点在滤纸上，滴加1%三氯化铝乙醇溶液，吹干,若在可见光下呈灰黄色，则说明有黄酮。③乙酸镁反应：取提取液

6、点在滤纸上，滴加1%乙酸镁甲醇溶液，吹干，若在紫外光下呈黄色斑点，则说明有黄酮。④盐酸一镁粉反应：取乙醇提取液lml于试管中加镁粉，再加入浓盐酸数滴(1次加入)，若在泡沫处呈紫红色，则说明有黄酮。(2)紫藤茎总黄酮含量的测定测定提取液的吸光度，利用上述标准曲线冋归公式求得质量浓度X；则黄酮类物质的提取率为：提取率(%)=X(mg/mL)X10.00mL/0.50mlX10.00mL/5.OOmLX25.OOmL/紫藤茎质量(mg)X100%4、纤维素酶法提取龙眼核小黄酮类物质酶法提取的工艺分为酶解和浸提两部分，准确称取紫藤茎粉l.Og,

7、加入缓冲溶液和一定比例的酶，紫藤茎经酶解后在一定的条件下浸提，过滤，定容，在一定的波长下测其吸光度。(1)单因素实验(a)不同酶解温度对总黄酮提取率的影响选用50%乙醇溶液，液料比1:20,调整pH=5,添加纤维素酶，反应温度分别为30°C、40°C、50°C、6(TC、70°C,提取一定吋间，得提取液，测定提取液中总黄酗含量，计算提取率，并作图找出较适宜的反应温度。以下单因素实验中均采用此反应温度。(b)不同浓度的酶用量对总黄酮提取率的影响选用50%乙醇溶液，液料比1:20巴调整pH=5,分别添加纤维素酶使其浓度分别为0.05>0.0

8、6、0.07、0.08、0.09、0」0mg/mL,固定反应温度和提取吋间,提取黄酮，得提取液。测定提取液中总黄酗含量，计算提取率，并作图找出较适宜的纤维索酶用量。以下单因索实验屮均采用此用量。(a)不同酶