大、小鼠卵泡培养方法及其在雌性生殖毒性研究中的应用

《大、小鼠卵泡培养方法及其在雌性生殖毒性研究中的应用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、第二军医大学博士学位论文缩写名llFSHhLHITS．mixrI-ICGrEGFⅣGIVMPMSGCOCsE2PGVGVBDPB．MIIGOCsORDEGDMSOCdCL2DEHPMEHPNocodazole．16．英文缩略词(Abbreviations)英文全称humanfolliclestimulatinghormonehumanluteneinizinghormoneimulin-transferrin-seleniummixrecombinanthumanchorionicgonadotrophinsrecombinantepiderm

2、algrowthfactorinvitrogrowthandmaturationofoocytesinvivogrowthandinvitromaturationofoocytespregnantmare翻玎啪gonadotrophincumulus-oocytecellcomplexesestradiolprogesteronegerminalvesiclegerminalvesiclebreakdownapolarbodymetaphaseIIgranulosa-oocytecomplexesoocytereleaseoocytedegen

3、erationdimethylsulfoxidecadmiumchloridedi-2-ethylhexylphthalatemono-2-ethylhexylphthalate5一(2-thienylcarbonyl)一1H—benzimidazol-2-yl中文全称人促卵胞激素人促黄体激素胰岛素一转铁蛋白一硒混合物重组人绒毛膜促性腺激素重组表皮生长因子卵母细胞体外生长和成熟卵母细胞体内生长和体外成熟孕马血清促性腺激素卵丘细胞．卵母细胞复合体雌二醇孕激素生发泡生发泡破裂极体第二次减数分裂颗粒细胞．卵母细胞复合体卵母细胞外逸卵母细胞退化二甲基亚

4、砜氯化镉邻苯二甲酸-(2一乙基己基)酯邻苯二甲酸单(2一乙基己基)酯噻氨酯哒唑独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任．学位论文作者签名：刁把壤日期：伽罗年莎月台日学位论文使用授权书声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被检阅或借阅。本人授权第二军医大学

5、可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：乃怂赢日期：脯占月易日导师签名：纬幺庞嗍：埘¨月7日大、小鼠卵泡培养方法及其在雌性生殖毒性研究中的应用摘要生殖和发育功能障碍是当前严重影响人体健康的主要公共卫生问题之一。外源性化学物作用于雌性生殖系统可以导致卵巢周期紊乱或不育，致使人群中自发性流产率、子代发育异常、生育力下降等显著增加。同时，雌性所有的配子在出生前就已经形成，出生时卵泡的数量是固定的，如果破坏了，无额外的配子补偿，后

6、果较雄性更严重。因此，筛选和鉴定具有雌性生殖毒性的化学物，阐明其毒作用机制，对防治化学物引起的生殖系统危害具有重要意义。近年来由于组合化学、计算机辅助药物设计等的快速发展带来新化学物的快速增长，现有毒理学评价方法已远远不能满足化学物快速增长的需求。因此，国际上的发展趋势是在方法学上要求发展符合“4R’’原则(替代、减少、优化和可靠性)、具有高通量、所需受试样品量少的试验方法。目前雌性生殖毒性评价方法主要采用体内试验，存在的主要问题是整体动物实验不敏感、周期长、所需受试样品量多。体内试验难以揭示毒作用位点和毒作用机制。为此，近几年国内外已经建立了

7、多种体外雌性生殖毒性试验方法，包括卵巢器官和卵巢皮质薄片培养方法和大鼠颗粒细胞和黄体细胞体外毒性试验方法。但这些体外方法无法对卵泡发育和卵子生成做出客观评价，而这应是雌性生殖毒性研究的关键所在。因此，迫切需要发展既能快速检测雌性生殖毒性又能更好地研究其作用机制的新方法。卵泡体外培养方法是近年来发展的将早期卵泡不成熟卵母细胞(GV期或GV前期)在体外发育到可正常受精的成熟卵母细胞(MII)的方法。由于该方法能对卵巢的主要功能即卵泡发育、激素生成和卵子发生进行动态观察，可在卵泡不同发育阶段对卵泡每一组分进行分析，因此受到生殖生物学和生殖毒理学界的关

8、注。目前国外已经成功建立或基本建立绵羊、猪、小鼠腔前卵泡体外培养模型，并已应用于生殖生物学和生理学对卵泡发育和调控的研究。已有学者尝试将小鼠模型用于生