基于微型光谱仪战地急救生化试剂的实验研究

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1、第三军医人学硕士学位论文基于微型光谱仪战地急救生化试剂的实验研究摘要目的：为适应高科技局部战争条件下对战地伤员(休克、出血、感染、多器官衰竭等重伤比例相应的增加)的救治保障需要，满足野战环境下急救设备便携、机动的需求，拟研制一种基于低电压启动的微型光谱仪进行检测，并可在野战条件下使用的生化检测仪器及配套试剂。其检测的指标包括血红蛋白、葡萄糖及血钾、钠、氯、二氧化碳，并将这几项指标组合在一起，形成急救生化的功能检测单元，通过一次检测获得6项检测结果。本研究重点在于对上述6种检测试剂进行方法改良与改进，使之能适用于微型光谱仪的检测要求，同时对其同步检测的可

2、行性进行探讨，为简化操作、缩短报告时间、适应野外检测创造条件，也为提高战地急救能力提供技术支持。方法：1、为每项检测指标在微型光谱仪的检测波长范围内(360nm～780nm)选择一种合适的方法及试剂；2、分别将选定的各项指标液体检测试剂制备为干试剂：对试剂干燥方式进行选择，同时对改善试剂外观及性能的添加剂种类和浓度进行筛选；3．将制备好的干试剂通过调整试剂样品稀释比、检测时间以及对显色剂进行调整替换，进行干试剂成分及测定方法的改进；4、初步观察各项指标检测试剂的性能：对干试剂的准确性、重复性、稳定性进行初步评价。5、将六项指标检测试剂同步冻干于自制检测

3、杯中，在微型光谱仪上进行整体检测的初步应用，同时对检测试剂性能进行再评价，对测定结果采用SPSS11．O软件进行统计学分析处理。6、对仪器的温控系统及磁力混匀系统进行使用评价。主要结果：1、血红蛋白检测试剂由高铁氰化钾，氰化钾，离子表面活化剂等成分配置而成，并直接进行冻干。制备后的干试剂具有良好的溶解性能，降低试剂样品稀释度为125：l，使冻干后试剂具有良好溶解性能，同时获得较好的线性范围。试剂准确性实验偏倚系7第三军医大学硕士学位论文数为5．76％、试剂批内变异系数为2．22％，批间变异系数均值为3．37％，试剂在3个月内稳定性能良好。2、葡萄糖检测

4、试剂由酶试剂、O．5％的自制色原TBHBA、以及109几的添加剂白蛋白制备而成，增加试剂样品稀释倍数为200：1，使试剂缩短检测时问为lOmin，且试剂准确性实验偏倚系数为3．28％，试剂批内变异系数为2．15％，批间变异系数均值为3．76％，试剂在3个月内稳定性能良好。3、钾离子检测试剂由四苯硼锂、蛋白水解酶、氢氧化钠以及209／L的添加剂木糖醇组成，制备好的干试剂保持了较好的溶解性能及反应性能。试剂准确性实验偏倚系数为4．13％，试剂批内变异系数为2．98％，批间变异系数均值为4．06％，试剂在3个月内稳定性能良好。4、钠离子检测试剂由B．半乳糖苷

5、酶、O一硝基酚半乳糖苷、缓冲液等组成，分两步进行冻干。制备好的干试剂溶解性能良好，且试剂准确性实验偏倚系数为2．79％，试剂批内变异系数为2．10％，批间变异系数均值为4．34％，试剂在3个月内稳定性能良好。5、氯离子检测试剂由硫氰酸汞、硝酸铁、硝酸汞等以及409几的添加剂右旋糖酐组成，将制备好的干试剂稀释倍数调整为loo：1，获得了较好的检测性能。试剂准确性实验偏倚系数为3．05％，试剂批内变异系数为2．10％，批间变异系数均值为3．15％，试剂在3个月内稳定性能良好。6、二氧化碳检测试剂由碳酸酐酶、指示剂及209／L的添加剂聚乙二醇组成，制备好的干

6、试剂准确性实验偏倚系数为3．27％，试剂批内变异系数为3．57％，批间变异系数均值为5．4l％，试剂在3个月内稳定性能良好。7、按照六项指标检测试剂的冻干方式，直接冻干于自制检测杯中，使用统一的稀释液，加样后自动进行磁力混匀及加热，孵育后由系统在指定波长下进行检测，通过电脑微处理快速输出报告。由检测结果显示，各指标检测试剂偏倚系数均在lO％以内，除二氧化碳检测试剂批间重复性(CV％)超出5％外，其余各项指标检测试剂批内及批问重复性(CV％)均小于5％，且测定结果与干化学分析仪VITROS．250相关性r>O．97。8、微型光谱仪空气孵育系统在3嘶n内能

7、够达到试剂孵育所需的37℃，同时混匀系统92％的磁力搅拌子混匀状态良好。结论：1、通过对血红蛋白、葡萄糖及钾、钠、氯、二氧化碳，六种急救生化检测试剂方法、成分的改进与改良，研制出了适用于微型光谱仪的检测干试剂。该试剂在三个8第二军医大学硕十学位论文月内稳定性能良好，测定结果准确、可靠，能够基本满足临床测定的要求，试剂便于保存和携带。2、多项目急救生化指标组合式检测所形成的功能检测单元，能够通过一次检测即可获得6项测定结果，可为伤员的现场救治提供必要的检验数据，同时缩短了报告时间，为及时救治提供了保证。3、低电压启动的微型光谱仪，采用干电池作动力，无需交

8、流电能完成自动孵育及混匀，整套装置具有良好的便携性和机动性，能够满足战场急救、现场快速检验的需