乙肝病毒核心蛋白对端粒酶逆转录酶表达调控作用及其分子机制的研究

乙肝病毒核心蛋白对端粒酶逆转录酶表达调控作用及其分子机制的研究

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时间:2019-02-09

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1、原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名:皇盛:茧日论文作者签名:盘!釜!驾日关于学位论文使用授权的声明本人同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的印刷件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。(保密论文在

2、解密后应遵守此规定)论文作者签名:导师签名:隧日期:兰堕垛七¨。目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1ABSTRACT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9符号说明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..18第一章前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯201。端粒和端粒酶⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯202.端粒酶与肿瘤的发生⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯213.HBV及其核心蛋白HBc⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22第二章材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯251.细胞系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯252.质粒与菌种⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..253.PCR引物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.264.抗体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..265.主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.266.一般试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.277.主要仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.29第三章方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯301.HBc蛋白影响肝癌细胞生长的体内试验研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.301.1动物实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..302.HBc蛋白对hTEI玎基因表达的调控作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.332.1细胞实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..332.2临床标本检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.373.hTERT在HBc促进肝癌细胞生长中的作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..373.1细胞生长曲线实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯373.2细胞克隆形成能力的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯384.HBc对hTERT启动子活性的调控机制研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..394.1IIB。对hTERT核,已,启动子的凋控作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.394.2HBc调节hTERT启动子活性关键区域的寻找⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.414.3HBc调节hTERT启动子活性关键位点的寻找⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.415.c.Ets.2蛋

5、白及相关信号通路分子在HBc调控hTERT表达中的作用研究..425.1HBc蛋白对c.Ets.2蛋白核转位的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.425.2HCC组织标本中HBc表达与c.Ets.2蛋白细胞定位的相关性分析⋯..435.3c.Ets.2在HBc调控hTERT基因表达中的作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.445.4.HBc对ERK通路活化的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯44第四章结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯451.HBc蛋白可促进肝癌细胞的体内生长⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.452.HBc可上调hTERT蛋白的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.453.hTERT在H

6、Bc促进肝癌细胞生长中发挥重要作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯..464.HBc对hTERT启动子活性的调控机制研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..465.c.Ets.2蛋白及相关信号通路分子在HBc调控hTERT表达中发挥重要作用48第五章讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯501.端粒、端粒酶与hTERT(此部分为文献综述)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯502.HBV、hTERT与HCC的发生(此部分为文献综述)⋯⋯⋯⋯⋯⋯513HBc蛋白结构和的生物学功能(此部分为文献综述)⋯⋯⋯⋯⋯..53参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..56致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.64攻

7、读学位期间发表的论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯65附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.66CATALOGUEAbstractinChinese⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..1AbstractinEnglish⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..;⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9SymbolicDescription⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯:⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..18Chapter1Preface⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯201.Telo

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