【5A版】色谱法概述.ppt

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1、色谱法概述主要内容1234色谱法的分类色谱法的发展色谱法的起源色谱法的定义、特点色谱法的基本原理56色谱术语研究植物叶子的组成时，他将植物色素的石油醚浸取液通过填充有碳酸钙的直立玻璃管，再用纯净的石油醚自上而下淋洗，随着淋洗的进行，发现不同色素向下移动的速度不同，最后色素中各组分互相分离，形成不同颜色的谱带。一、色谱法的起源1906年由俄国植物学家Tswett创立色谱柱流动相固定相石油醚色谱原型装置玻璃管碳酸钙谱带二、色谱法的发展色谱方法的发展色谱理论的发展1.色谱方法的发展1968年前后高效液相色谱法1975年离子色谱法80年代初

2、超临界流体色谱法80年代中后期毛细管电泳法90年代后期毛细管电色谱法目前胶囊色谱、手性分离色谱、高分辨色谱、多维色谱1935年离子交换柱色谱法1941年液液分配柱色谱法1944年纸色谱法1952年气相色谱法1956年薄层色谱法1959年凝胶柱色谱法2.色谱理论的发展在各种色谱方法建立的同时，色谱理论也逐步发展和成熟起来。主要有:塔板理论速率理论气相色谱发展初期，Martin等人借助分馏中的塔板概念，把色谱柱设想为由许多塔板组成的分馏塔，把色谱分离过程比拟作分馏过程，提出了表达柱效能模式的塔板理论。012345LH色谱柱ΔV（1）塔板

3、理论L:色谱柱柱长;H:理论塔板高度;ΔV：样品体积气相色谱兴起之后，科学家们在实际研究中发现得到的色谱峰往往是展宽的图形，塔板理论无法解释这种现象。为此，荷兰学者VanDeemter等人于1956年提出了速率理论。该理论吸收了塔板理论中理论塔板高度的概念，并同时考虑影响理论塔板高度的动力学因素（涡流扩散、分子扩散、传质阻力、载气流速等），研究色谱分离过程中的动力学因素对峰展宽的影响，对色谱分离条件的选择具有指导意义。速率理论为气相色谱法的实践提供了理论指导，同时为高效液相色谱法的创建提供了启迪和依据。（2）速率理论气相色谱高效液相

4、色谱高效凝胶色谱毛细管电泳经过一个世纪的发展，色谱法无论是在理论上、方法上、设备上及文献资料上都已经成熟了；已被广泛应用于医药卫生、食品、环境、材料、化工、农业及生命科学等各个领域，成为分离分析多组分混合物的极为重要的研究手段。色谱法（Chromatography）又叫色层法或层析法，是一种分离分析技术，是分离分析多组分混合物质的极有效的物理及物理化学分析方法；是以试样中各组分与固定相和流动相之间的相互作用力（如吸附、分配、离子交换、排阻、亲和等作用力）的差异为依据而建立起来的各种分离分析方法。三、色谱法的定义、特点1、色谱法的定义

5、•固定不动的一相，称为固定相，可以是固体或液体。•携带试样混合物流过固定相的流体称为流动相，可以是气体、液体或超临界流体。•内有固定相，用以分离混合物的柱管称为色谱柱。几个概念气相毛细管柱液相柱凝胶色谱柱2、色谱法的特点分离效率高分析速度快灵敏度高样品用量少选择性好多组分同时分析分离和测定同时完成应用广泛易于自动化四、色谱法的分类按流动相和固定相的状态分类按固定相的操作方式分类按色谱过程的分离机制分类从色谱法的发展知，各种类型的色谱法很多，可从不同的角度对其进行分类。主要有以下三种：1、按流动相和固定相的状态分类随着色谱工作的发展，

6、通过化学反应将固定液键合到载体表面，这种采用化学键合固定相的色谱法称为键合相色谱法(4)流动相固定相类型液体固体液-固色谱液体液体液-液色谱气体固体气-固色谱气体液体气-液色谱液相色谱LC气相色谱GC(1)(2)(3)SFC超临界流体色谱超临界流体2、按固定相的操作形式分类柱色谱平面色谱固定相装在管柱内固定相呈平面状填充柱色谱毛细管柱色谱按照管柱的粗细和固定相的填充方式高分子薄膜色谱薄层色谱纸色谱按平面材料的不同柱色谱法：将固定相装在一金属或玻璃柱中或是将固定相附着在毛细管内壁上做成色谱柱，试样从柱头到柱尾沿一个方向移动而进行分离的

7、色谱法。纸色谱法：利用滤纸作固定液的载体，把试样点在滤纸上，然后用溶剂展开，各组分在滤纸的不同位置以斑点形式显现，根据滤纸上斑点位置及大小进行定性和定量分析。以吸附水分的滤纸作固定相薄层色谱法：将适当粒度的吸附剂作为固定相涂布在平板上形成薄层，然后用与纸色谱法类似的方法操作以达到分离目的。以涂敷在玻璃板上的吸附剂作固定相3、按色谱过程的分离机制分类吸附色谱法分配色谱法离子交换色谱法尺寸排阻色谱法亲和色谱法生物色谱法（1）吸附色谱法：用固体吸附剂作固定相，根据样品中不同组分在吸附剂上的物理吸附性能的差异进行分离。如气固色谱法、液固色谱

8、法。（2）分配色谱法：用液体做固定相，根据不同组分在固定相（液体）和流动相之间分配系数的不同进行分离。如气液色谱法、液液色谱法。（3）离子交换色谱法：固定相是离子交换剂，依据离子型化合物中各离子组分与离子交换剂上表面带电荷基团进行可逆