人白细胞介素5elisa试剂盒

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1、DESCRIPTION人白细胞介素5ELISA试剂盒产品编号：SEKH-0012适用于人血清、血浆或细胞培养上清液等样本仅供研究，不用于临床诊断订购热线:400-968-6088﹡技术支持邮箱:service@solarbio.com公司官网:www.solarbio.comDESCRIPTION目录背景介绍…………………………………………….............................................…………………………………01检测原理……………………………………………………………………………………………………………01注意事项………………………………………

2、……………………………………………………………………02安全提示……………………………………………………………………………………………………………02试剂盒组成及储存…………………………………………………………………………………………………03自备实验器材………………………………………………………………………………………………………03样品收集及储存……………………………………………………………………………………………………03试剂准备……………………………………………………………………………………………………………04检测步骤…………………………………………………………………………………

3、…………………………06结果判断……………………………………………………………………………………………………………06参数表征……………………………………………………………………………………………………………07参考文献……………………………………………………………………………………………………………09常见问题分析及解决办法…………………………………………………………………………………………10DESCRIPTIONDESCRIPTION背景介绍：人IL-5由抗原活化的CD4+T细胞产生，在小鼠则由Th2亚群细胞产生。天然IL-5的分子量为40~50KD，是由二硫键连接的二聚体糖蛋白，但

4、是单体IL-5也有IL-5活性。人的IL-5由134氨基酸残基组成，含22氨基酸残基信号肽，2个糖基化点，人和小鼠IL-5基因分别定位于第5号和第11号染色体，人和鼠IL-5在氨基酸水平上有70％的同源性，人和鼠IL-5Rα链有79％的同源性。IL-5主要有促进B细胞分化与生长;诱导嗜酸性粒细胞分化;促进IgA合成;诱导细胞毒T细胞(CTL)的生成以及刺激嗜酸性粒细胞增殖、分化及活化等作用。检测原理：Solarbio(Solarbio®)ELISA试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。将抗人IL-5单克隆抗体包被在酶标板上；分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本，标准品和样本中

5、的人IL-5会与酶标板上的包被抗体充分结合；洗板后加入生物素化抗人IL-5抗体，该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的人IL-5发生特异性结合；洗板后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合；洗板后加入显色剂底物TMB，若反应孔中样品存在不同浓度的人IL-5，则HRP会使无色TMB变成不同深浅（正相关）的蓝色物质，加入终止液后反应孔会变成黄色；最后，在λmax=450nm（OD=450nm）处测定反应孔样品吸光度（OD），样本中的人IL-5浓度与OD成正比，通过绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出样本中人IL-5的浓度。原理图：1T

6、el:(+86)01056371202Web:www.solarbio.netDESCRIPTION注意事项：1.试剂盒应在有效期内使用，请不要使用过期的试剂。2.试剂盒未使用时应保存在2-8℃冰箱，已复溶但未用完的标准品，请丢弃。3.试剂盒使用前请在室温恢复30min，且充分混匀试剂盒里的各种成份及制备的样品。4.在试验中标准品和样本建议作复孔检测，且加入试剂的顺序应保持一致。5.为避免交叉污染，请在试验中使用1次性试管，枪头，封板膜（※）及洁净塑料容器。.6.浓缩生物素化抗体和浓缩酶结合物的体积较少，在运输过程中微量液体会沾到管壁及瓶盖上，使用前请离心处理（5-10S即可），使管壁上的

7、液体集中在管底部，取用时，请用移液器小心吹打几次。7.除了试剂盒中的浓缩洗涤液和终止液可以通用外，请不要使用其他来源试剂盒内含的试剂代替本试剂盒中的某单个组分。8.为保证结果准确，每次检测均需做标准曲线。安全提示：试剂盒中的终止液为酸性溶液，操作人员在使用时请带上手套并注意防护；在操作过程中也要避免试剂接触皮肤和眼睛，如果不慎接触，请用大量清水清洗；检测血液样本及其它体液样本时，请按国家生物实验室安全防护有关管理规定执行